6-ROX glycine(6-ROX 甘氨酸),25μM 货号: R2021 规格: 1 mL

6-ROX glycine(6-ROX 甘氨酸),25μM

产品货号: R2021

产品规格: 1 mL

目录价(元):354

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产品概述:

产品参数

Ex/Em:575/602 nm

分子量:591.7

 

储存条件

-20长期避光保存,避免反复冻融,有效期见外包装。短期使用可放4℃

 

产品介绍

6-ROX是一种用于在实时定量PCR中的荧光报告基因信号进行标准化的ROX参比染料,与其他罗丹明染料相比,6-ROX非常不稳定。但经改良后的6-ROX glycine具有较好的稳定性。6-ROX glycine具有与6-ROX相似的光谱性质。该参比染料是溶于20 mM TrispH 8.4),0.1 mM EDTA0.01Tween 20中的25 μM溶液。

 

ROX参比染料

对与PCR无关的荧光波动进行标准化

为多重定量PCRRT-PCR提供稳定的基线

使用现有的ROX光谱设置,无需重复校正热循环仪

 

注意事项

1. 对于低ROX机型,为使每个反应精确加入1 μL,推荐用前将ROX用无菌超纯水进行10倍稀释,再进行实验操作。

2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

不同仪器ROX推荐使用终浓度:

Instrument

ROX per 50 µL PCR Reaction

Final Concentration

ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT

and 7900HT Fast, ABI Step One, ABI Step One Plus

1.0 µL

(0.6-1.0 µL)

500 nM

(300-500 nM)

ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene

Mx3000P, Mx3005P, Mx4000, MJ

Research Chromo4, OPtcon(II),

Corbet Rotor Gene 3000

1.0 µL

(0. 6-1.0 µL)

50 nM

(30-50 nM)


说明书:

6-ROX glycine(6-ROX 甘氨酸),25μM 货号:               R2021  规格:               1 mL R2021    
MSDS:

MSDS R2021 6-ROX glycine,25μM

SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(5×,还原) 货号: S6168 规格: 10 mL

SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(5×,还原)

产品货号: S6168

产品规格: 10 mL

目录价(元):179

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产品概述:

储存条件

-20℃保存,有效期见外包装

 

产品介绍

SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(5×,还原)是一种以溴酚蓝为染料的上样缓冲液,可用于还原型聚丙烯酰氨凝胶电泳中蛋白样品的制备和上样。本产品中含有还原剂DTT,可有效打开二硫键使得依靠二硫键连接的各蛋白亚单位彼此分离。

按每孔5 μL上样量计算,10 mL本产品可以做10000个孔。

 

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. 产品使用前请恢复至室温,确保溶液呈均一状态。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(5×,还原) 货号:               S6168  规格:               10 mL S6168    

Oxazole yellow(恶唑黄), 1mM in DMSO 货号: Y4077 规格: 1 mL

Oxazole yellow(恶唑黄), 1mM in DMSO

产品货号: Y4077

产品规格: 1 mL

目录价(元):3600

推荐仪器:流式细胞仪、荧光显微镜

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产品概述:

产品参数
Ex/Em (结合DNA) = 491/509 nm
CAS号:152068-09-2
分子式:C24H29I2N3O
分子量:629.3
分子结构:
Oxazole yellow(恶唑黄), 1mM in DMSO 货号:               Y4077  规格:               1 mL

储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。

产品介绍
Oxazole yellow等同于YO-PRO-1 Iodide,是一种非细胞膜穿透性的高亲和力的羰花青单体核酸绿色荧光染料,在没有核酸的情况下基本上是非荧光的。该染料可用于鉴定凋亡细胞,Oxazole yellow可渗透进入早期凋亡细胞,对早期凋亡细胞进行染色,而碘化丙锭(PI, P4034)(一种死细胞染色)对早凋细胞保持非渗透性,但可染色晚凋细胞,这两种染料结合使用,可以区分早凋细胞和晚凋细胞。由此,本司推出了Oxazole yellow和PI联合的膜透性细胞凋亡检测试剂盒,用于区分早凋和晚凋细胞。
以贴壁细胞(96孔板)举例,每孔100 μL染色工作液,配置为工作液(5 µM)大概可以用于2000个孔的染色。

注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作


说明书:

Oxazole yellow(恶唑黄), 1mM in DMSO 货号:               Y4077  规格:               1 mL Y4077    
常见问题解答:

该染料与PI联用可以做组织切片染色吗?

不适合组织切片。

Hoechst 33258染色液(即用型) 货号: H4078 规格: 10 mL

Hoechst 33258染色液(即用型)

产品货号: H4078

产品规格: 10 mL

目录价(元):120

推荐仪器:荧光显微镜

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产品概述:

产品参数
Ex/Em(结合 DNA)= 352/461 nm
Ex/Em(未结合 DNA)= 346/460 nm
CAS号:23491-45-4
分子式:C25H24N6O • 3HCl
分子量:533.9
分子结构图:

Hoechst 33258染色液(即用型) 货号:               H4078  规格:               10 mL

储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。

产品介绍
Hoechst 33258,也称bis Benzimide H 33258或HOE 33258,是一种非嵌入性的亮蓝色荧光染料。染料在溶液中荧光较弱,它们在活细胞中DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合后荧光变得明亮,故此类染料也被称为DNA探针。因背景较低,故染色细胞不需洗涤步骤,且染色非常稳定,对活细胞无毒,结合DNA染色后可持续几天或更长时间。Hoechst 33258与Hoechst 33342相比在水中的溶解度要高,但两种染料均具有高细胞膜渗透性,被广泛用于细胞凋亡检测,染色后可用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。
以贴壁细胞(96孔板)举例,每孔100 μL染色液,10 mL可以用于100个孔的染色。


注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 如需调整使用浓度,请选择H4046,自行配置合适的工作液浓度。
3. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议活细胞或组织染色后立即观察。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

Hoechst 33258染色液(即用型) 货号:               H4078  规格:               10 mL H4078    
MSDS:

MSDS H4078 Hoechst 33258 (Ready to use)
使用本产品的文献:

参考文献
1.Hoechst 33258 staining for detecting mycoplasma contamination in cell cultures: a method for reducing fluorescence photobleaching
应用方向:检测细胞培养中支原体污染

2.A rapid method for accurate DNA measurements in single cells in situ using a simple microfluorimeter and Hoechst 33258 as a quantitative fluorochrome
应用方向:对单个细胞精确的DNA定量

3.Fluorometric assay of DNA in cartilage explants using Hoechst 33258
应用方向:DNA含量测定

4.Use of Merocyanine 540 and Hoechst 33258 for the selective killing of contaminating mycoplasmas in cell cultures
应用方向:与Merocyanine 540联用,选择性杀灭支原体

5.Combined use of fluorescent peanut agglutinin lectin and Hoechst 33258 to monitor the acrosomal status and vitality of human spermatozoa
应用方向:监测人精子顶体状态和活力

6.2′‐Deoxyadenosine Induces Apoptosis in Rat Chromaffin Cells
应用方向:观察细胞的形态学特征

7.A novel, sensitive fluorometric staining techniqUE for the detection of DNA in RNA preparations
应用方向:琼脂糖凝胶电泳中DNA的检测

8.Automated determination of DNA using the fluorochrome Hoechst 33258
应用方向:DNA浓度

9.A simple DNA-dependent fluorescence enhancement assay for cell number
应用方向:细胞计数

10.Chromosome sorting and DNA seqUEnce localization
应用方向:染色体分选

11.Fluorometric Properties of the Bibenzimidazole Derivative Hoechst 33258, a Fluorescent Probe Specific for AT Concentration in Chromosomal DNA
应用方向:染色体Q带的识别

12.12/15-lipoxygenase translocation enhances site-specific actin polymerization in macrophages phagocytosing apoptotic cells
应用方向:细胞核染色

Annexin V-PE 偶联物 货号: A6065S/A6065L 规格: 0.1 mL/1 mL

Annexin V-PE 偶联物

产品货号: A6065S/A6065L

产品规格: 0.1 mL/1 mL

目录价(元):467/3536

推荐仪器:流式细胞仪

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产品概述:

储存条件

4℃避光冷藏,请勿冻存。有效期见外包装

 

光谱特性

Annexin V-PEEx/Em = 488/578 nm

 

产品介绍

Annexin V(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36 KDCa2+依赖性磷脂结合蛋白,可与磷脂酰丝氨酸(PS)选择性结合。磷脂酰丝氨酸(PS)主要分布在细胞膜内侧,即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期,不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面,暴露在细胞外环境中。此时,使用荧光蛋白PE标记的Annexin VAnnexin V-PE,与外翻的磷脂酰丝氨酸(PS)结合,就可用流式细胞仪直接检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。正常细胞不会被Annexin V-PE所染色,发生凋亡或坏死的细胞会被Annexin V-PE所染色。Annexin V-PE可以与部分非渗透性的细胞核染料(7-AAD/PI)联合使用,区分处于不同凋亡时期的细胞。

 

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. 为降低细胞凋亡进程,孵育过程可在冰上操作,但孵育时间至少延长至30 min

3. 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1 h之内进行分析。

4. 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-PE的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTAEDTA会影响Annexin VPS的结合。

5. 贴壁细胞用胰蛋白酶消化后,建议在最佳培养条件和培养基中恢复约30 min后染色,避免假阳性。

6. 为了避免洗涤细胞时损失细胞,在吸液时可以用大的Tip头套上小的Tip头吸液。

7. 染料的最佳使用浓度由具体实验要求确定。

8. 荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

9. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

Annexin V-PE 偶联物 货号:               A6065S/A6065L  规格:               0.1 mL/1 mL A6065S/A6065L    
MSDS:

MSDS A6065 Annexin V-PE

蛋白酶抑制剂混合液(EDTA-Free,100× in DMSO) 货号: P6163 规格: 1 mL

蛋白酶抑制剂混合液(EDTA-Free,100× in DMSO)

产品货号: P6163

产品规格: 1 mL

目录价(元):258

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产品概述:

储存条件
-20℃保存,有效期见外包装。

产品介绍

细胞或组织提取物等样品中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物等样品中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
本产品是一种广谱型用于细胞或组织蛋白提取等的蛋白酶抑制剂混合液,含有Aprotinin、Bestatin、Leupetin、Pepstatin、PMSF等多种抑制剂成分,可以有效抑制常规抽提和纯化蛋白中的各种蛋白酶活性,如氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、丝氨酸蛋白酶、苏氨酸蛋白酶、酪氨酸和天冬氨酸蛋白酶等。

注意事项
1. 本产品中含有的蛋白酶抑制剂对人体有害,请小心操作,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 本产品仅限科研使用。


说明书:

蛋白酶抑制剂混合液(EDTA-Free,100× in DMSO) 货号:               P6163  规格:               1 mL P6163    

LipoGene 2000 Star 转染试剂(低毒款) 货号: L7002S/L7002M/L7002L 规格: 50 μL/0.75 mL/1.5 mL

LipoGene 2000 Star 转染试剂(低毒款)

产品货号: L7002S/L7002M/L7002L

产品规格: 50 μL/0.75 mL/1.5 mL

目录价(元):200/1695/2350

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产品概述:

储存条件
4℃保存,有效期见外包装(避免冷冻)。

产品介绍

LipoGene 2000 Star转染试剂相较于LipoGene 2000 Plus转染试剂(高效款)(CAT:L7003)来讲,对细胞毒性更低,更适用于对毒性敏感的细胞转染。适用于把质粒、siRNA或其它形式的核酸包括DNA、RNA、寡核苷酸转染到真核细胞中。
LipoGene 2000 Star转染试剂对于常见的哺乳动物细胞具有非常高的转染效率、重复性好、操作简单、无明显的细胞毒性,并且对于贴壁细胞和悬浮细胞都适用。
LipoGene 2000 Star转染试剂的使用方法和常用的T公司L* 2000 Reagent完全一致,转染效率比L* 2000 Reagent更高。
LipoGene 2000 Star转染试剂不仅适用于质粒、siRNA等单一成分的细胞转染,也适合多个质粒或者质粒与siRNA等的组合转染。
LipoGene 2000 Star转染试剂转染过表达质粒后,通常24-48 h后达到较高的蛋白表达水平,并且很多情况下蛋白表达量在转染后48 h显著高于转染后24 h;转染siRNA通常3-5天后对于目的基因的下调水平会比较理想。
LipoGene 2000 Star转染试剂转染细胞时,基本不受细胞培养液中血清影响,即可以在血清存在的情况下进行细胞转染。但为了取得最佳的转染效果,推荐转染时使用不含抗生素培养液。转染后不必去除转染液,或者改变或添加培养基,但转染4-6 h后可去除转染液。
以96孔板转染单个DNA质粒计算,0.75 mL的LipoGene 2000 Star转染试剂(低毒款)可做1500个孔。

注意事项
1. 使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率。
2. 转染前细胞必须处于良好的生长状态。
3. 需自备不含抗生素的无血清培养液或Opti-MEM®培养液或普通的DMEM培养液。
4. LipoGene 2000 Star转染试剂不能vortex或离心,宜缓慢晃动混匀。
5. LipoGene 2000 Star转染试剂使用后请立即盖好盖子,避免长时间暴露在空气中,影响转染效率。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

LipoGene 2000 Star 转染试剂(低毒款) 货号:               L7002S/L7002M/L7002L  规格:               50 μL/0.75 mL/1.5 mL L7002S/L7002M/L7002L    
MSDS:

L7002 LipoGene 2000 Star Transfection Reagent(Low toxicity)
使用本产品的文献:

1.Spotted knifejaw (Oplegnathus punctatus) MyD88: Intracellular localization, signal transduction function and immune responses to bacterial infection
Xiaobing Liu,XUEmei Li,Xinxin Du,Minmin Sun,Xuangang Wang,Wensheng Li,Jieming Zhai,Jinxiang Liu,Haiyang Yu,Quanqi Zhang.
Fish & Shellfish Immunology(2019)
应用方向:质粒转染HEK-293T cells

2.Severe Fever With Thrombocytopenia Syndrome Virus-Induced Macrophage Differentiation Is Regulated by miR-146
Li Zhang, Yuxuan Fu1, Huanru Wang, Yajie Guan, Weiwen Zhu, Mengdi Guo, Nan Zheng and Zhiwei Wu
Frontiers in immunology(2019)
应用方向:质粒转染THP-1细胞

特级胎牛血清(Fetal Bovine Serum) 货号: F9070S/F9070L 规格: 10 mL/500 mL

特级胎牛血清(Fetal Bovine Serum)

产品货号: F9070S/F9070L

产品规格: 10 mL/500 mL

目录价(元):346/5770

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产品概述:

储存条件
-20℃保存,有效期见外包装;4℃保存通常不宜超过1个月

产品介绍
本产品是通过无菌手术剖腹后取牛胚胎,穿刺心脏采血加工制成,未人为添加任何外源因子,激素等。本产品经0.65 μm、0.22 μm微孔滤膜预过滤,3次0.1 μm微孔滤膜精过滤,无支原体、无细菌、无噬菌体、BVDV病毒等污染,内毒素水平极低。优逸兰迪特级胎牛血清适用于多种干细胞、免疫细胞、神经细胞、细胞系、肿瘤细胞等细胞的培养要求。细胞生长速度正常,形态良好。品质完全可以媲美进口澳洲血源的胎牛血清,是替代澳洲胎牛血清的理想产品。

适用细胞
原代细胞:MSC、EC、SC,原代肿瘤细胞等
干细胞:间充质干细胞、脐带干细胞、胚胎干细胞等
正常细胞系:3T3-L1、16HBE、293、293T、HBMEC、huvec、VK3/E6E7、marcl45、MEF、Vero、MDCK、BHK-21、BV2、NHEK、HGMC等
免疫细胞:THP1、CEM、Jurkat、Ana-1、MOLT-4、RAW264.7等
神经细胞: PC12、SH-SY5Y等
肿瘤细胞等:A549、NCI-H446、NCI-H460、NCI-H292、NCI-H1975、95-D、SPCA-1、LLC、BGC-823、SGC-790、MKN-4、MKN45、MKN28、MHCC97H、LM3、SMCC7721、HepG2、Hep3B、PLC/PRF/5、AU565、ZR-75-1、BT-474、MDA-MB-453、ISK、HEC-1A、HEC-1B、KLE、SCC-4、fadu、SCC-090、hep-2、ACHN、A498、769-P、DLD、P815、Hela、5-8F等

注意事项
1. 血清解冻后应尽快用完,尽量避免反复冻融。如果不能短期内使用完毕,解冻后请适当分装。血清结冰时体积会增加约10%,因此在分装血清时须使分装瓶预留一定体积空间,否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。
2. 血清解冻时应将血清从-20℃的低温冰箱中取出放入4℃冰箱解冻1天,待全部解冻后再分装。解冻过程中请不时摇匀(小心勿造成气泡),使血清成分和温度均匀,从而减少沉淀的产生。
3. 切勿直接将血清从-20℃或更低温度进入37℃水浴解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀,从而使血清的质量下降。
4. 解冻后未开封前若发现有絮状沉淀,属正常现象。血清中的絮状沉淀物主要是解冻后血清中纤维蛋白及4℃长时间保存后血清中的脂蛋白变性造成的,不会影响血清本身的质量,可不用处理,也可400×g离心5 min去除,但不宜过滤去除,因为絮状物可能阻塞滤膜。
5. 本产品未经灭活处理,使用时请视实验情况进行处理,灭活条件为56℃,30 min。除非必须,一般不建议对血清进行热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多。


说明书:

特级胎牛血清(Fetal Bovine Serum) 货号:               F9070S/F9070L  规格:               10 mL/500 mL F9070S/F9070L    

RIPA裂解液(强,无抑制剂) 货号: R6166 规格: 100 mL

RIPA裂解液(强,无抑制剂)

产品货号: R6166

产品规格: 100 mL

目录价(元):179

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产品概述:

产品介绍

RIPA裂解液(强,无抑制剂)可用于裂解细胞/组织,有效提取细胞质、细胞膜及细胞核蛋白,获得的蛋白样品可用于常规的蛋白分析,如Western BlotIP等。本产品的主要成分为100 mM Tris-HCL(pH 8.0)150 mM NaCl1% Triton X-1001% deoxycholic acid0.1% SDS等。

UElandy提供的另外一款WesternIP细胞裂解液(W6001,其有效裂解成分为1% NP-40。相较于RIPA裂解液(强,无抑制剂)其裂解能力相对较弱,但能够满足一般用户需求。遇到某些难溶解蛋白的Western,若发现WesternIP细胞裂解液效果不是非常理想,可以尝试使用裂解强度更高的RIPA裂解液(强,无抑制剂)(R6166)。

以贴壁细胞(6孔板)举例,每孔200 μL RIPA裂解液100 mL试剂大概可以用于500个孔。


注意事项

1. RIPA解液(强,无抑制剂)含有较高浓度的去垢剂,因此与Bradford法测定蛋白浓度不兼容,如需测定蛋白浓度可选本公司生产的BCA蛋白定量检测试剂盒(B6167)。

2. RIPA裂解液(强,无抑制剂)不含有蛋白酶或其他酶的抑制剂,使用前请根据实验需求加入酶抑制剂,以防蛋白降解。

3. 裂解过程需在冰上进行。

4. Hela细胞为例,1 × 106 cells需要200 μL预冷的RIPA裂解液,该裂解液的量相对较充足,在有限细胞的情况下,如需提高蛋白浓度,可适当减少裂解液的量。

5. 裂解产物中如若出现的一小团透明胶状物,属于正常现象,是含有基因组DNA的复合物。


说明书:

RIPA裂解液(强,无抑制剂) 货号:               R6166  规格:               100 mL R6166    

通用型抗体稀释液 货号: W6173 规格: 100 mL

通用型抗体稀释液

产品货号: W6173

产品规格: 100 mL

目录价(元):179

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产品概述:

储存条件
4℃存储。长期保存于-20℃。有效期见外包装。

产品介绍

该通用型抗体稀释液含有多种抗体保护剂,可增加抗体的活性和稳定性;不含有血清,具有极高的信噪比;不含生物素,对于生物素的检测较友好,兼容辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和生物素标记的二抗;可以减少抗体非特异性结合,同时提高实验的特异性和灵敏度。该产品可直接用于一抗/二抗的稀释,无需添加任何额外的试剂,适用于Western Blot、IHC及 IF 等多种实验。
以YF®488 Goat Anti-Mouse IgG (H&L)(Y6104)荧光二抗为例,按照1:100进行抗体稀释,96孔板需100 μL二抗稀释液进行孵育,则需通用型抗体稀释液100 μL100 mL试剂大概可以用1000次。

注意事项
1. 本产品稀释和配制的抗体可以在4℃保存和使用不少于6个月,并可重复使用,直至不能达到理想结果后丢弃。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

通用型抗体稀释液 货号:               W6173  规格:               100 mL W6173    

通用型组织细胞固定液 货号: U6175 规格: 500 mL

通用型组织细胞固定液

产品货号: U6175

产品规格: 500 mL

目录价(元):134

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产品概述:

储存条件
4℃保存,有效期见外包装。

产品介绍

通用型组织细胞固定液是一种可对细胞、组织及组织切片等样本进行固定的即用型溶液,具有穿透组织能力强,固定均匀,损失小,能够很好的保存组织的固有物质,且保持其抗原性和细微结构等特点。本产品被广泛用于IHC、ICC、IF、FACS等检测技术的样本固定步骤,无需稀释,即开即用。
按照96孔板每孔100 μL通用型组织细胞固定液进行使用的情况下,500 mL试剂最多可使用5000次。

注意事项
1. 本产品对人体有害,请小心操作,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
2. 本产品仅限科研使用,不得用于临床诊断、食品或药品,不得存放于普通住宅内。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

通用型组织细胞固定液 货号:               U6175  规格:               500 mL U6175    

磷酸酶抑制剂混合液(EDTA-Free,100×) 货号: P6164 规格: 1mL

磷酸酶抑制剂混合液(EDTA-Free,100×)

产品货号: P6164

产品规格: 1mL

目录价(元):288

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产品概述:

储存条件
-20℃存储。有效期见外包装。

产品介绍
本品是一种广谱磷酸酶抑制剂,含Sodium orthovanadate、Sodium tartrate、Sodium pyrophosphate decahydrate,、Imidazole、Sodium molybdate、Sodium fluoride、Cantharidin、β-Glycerophosphate等8种高效磷酸酶抑制剂,在抽提和纯化蛋白时能够高效抑制Acid Phosphatase、Serine/Threonine Phosphatase、Alkaline phosphatase、Tyrosine Phosphatase等细胞内所含的磷酸酶,比同类产品(一般含3~4种抑制剂)拥有更全面的磷酸酶抑制能力。获得的蛋白可用于Western Blot、Co-IP、pull-down、IF、IHC 等蛋白质含量或其活性分析实验。以RIPA裂解液(强,无抑制剂)(R6166)裂解6孔板中的Hela细胞举例,200 μL的裂解液中需加入2 μL磷酸酶抑制剂混合液(EDTA-Free,100×),1 mL试剂则大概可以用500次。


注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 本产品的浓度较高,因此存放期间可能会出现微量晶体状沉淀,属于正常现象,不影响实验结果。
3. 本产品不适合与含有EDTA的蛋白酶抑制剂联合使用,因为EDTA会严重影响磷酸酶抑制剂混合液的抑制效果。
4. 不同来源的样品中,磷酸酶的含量有所差异,因此可适当根据磷酸酶含量调整磷酸酶抑制剂混合液的使用浓度。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
6. 所有抑制剂对人体均有毒,请注意自身防护。若不小心与接触皮肤,请立即用大量清水冲洗。若不慎吞食,应立即就医处理。


说明书:

磷酸酶抑制剂混合液(EDTA-Free,100×) 货号:               P6164  规格:               1mL P6164    

优级胎牛血清(VSA) 货号: F9052S/F9052L 规格: 10 mL /500 mL

优级胎牛血清(VSA)

产品货号: F9052S/F9052L

产品规格: 10 mL /500 mL

目录价(元):269/4488

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产品概述:

储存条件

-20℃保存,有效期见外包装;4℃保存通常不宜超过1个月

产品介绍
本产品是通过无菌手术剖腹后取牛胚胎,穿刺心脏采血加工制成,未人为添加任何外源因子,激素等。本产品经0.65 μm、0.22 μm微孔滤膜预过滤,3次0.1 μm微孔滤膜精过滤,无支原体、无细菌、无噬菌体、BVDV病毒等污染,内毒素水平极低。本产品满足多种肿瘤原代细胞,常见细胞系以及各种肿瘤细胞等的培养要求,品质完全可以媲美进口南美血源的胎牛血清,是替代南美胎牛血清的理想产品。

适用细胞
多种肿瘤原代
细胞系:293、293T、CHO、SF9、Vero、Hela、MDCK、BHK-21、PK-15、HK-2、C2C12等
肿瘤细胞:P815、HepG2、PC-3、A549、fadu、Caco-2、LLC等
免疫细胞THP1、Ana-1、MOLT-4、RAW264.7等

注意事项
1. 血清解冻后应尽快用完,尽量避免反复冻融。如果不能短期内使用完毕,解冻后请适当分装。血清结冰时体积会增加约10%,因此在分装血清时须使分装瓶预留一定体积空间,否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。
2. 血清解冻时应将血清从-20℃的低温冰箱中取出放入4℃冰箱解冻1天,待全部解冻后再分装。解冻过程中请不时摇匀(小心勿造成气泡),使血清成分和温度均匀,从而减少沉淀的产生。
3. 切勿直接将血清从-20℃或更低温度进入37℃水浴解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀,从而使血清的质量下降。
4. 解冻后未开封前若发现有絮状沉淀,属正常现象。血清中的絮状沉淀物主要是解冻后血清中纤维蛋白及4℃长时间保存后血清中的脂蛋白变性造成的,不会影响血清本身的质量,可不用处理,也可400×g离心5 min去除,但不宜过滤去除,因为絮状物可能阻塞滤膜。
5. 本产品未经灭活处理,使用时请视实验情况进行处理,灭活条件为56℃,30 min。除非必须,一般不建议对血清进行热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多。


说明书:

优级胎牛血清(VSA) 货号:               F9052S/F9052L  规格:               10 mL /500 mL F9052S/F9052L    

丽春红染色液(1×) 货号: P6176 规格: 100 mL

丽春红染色液(1×)

产品货号: P6176

产品规格: 100 mL

目录价(元):100

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产品概述:

产品内容:

组分

浓度

分子量

丽春红S

0.1%(W/V)

760.6

• 红色液体,0.22 μm膜过滤纯化

储存条件
室温保存,有效期见外包装。

产品介绍

丽春红本身带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,同时也能与蛋白的非极性区相结合,从而形成红色的清晰条带。而且丽春红对蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸馏水,PBS或其它适当溶液洗去,不会对后续实验产生影响。
本品常用于PVDF膜、硝酸纤维素膜(nitrocellulose membrane)和醋酸纤维素膜(cellulose acetate membrane)上的蛋白的检测;

使用方法
1. 蛋白转印完成后,将PVDF膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜完全浸入丽春红染液中,摇动染色3~5min或更长时间。待清晰条带出现后,取出进行检测记录。
2. 使用纯水、PBS缓冲液或其他适宜溶液漂洗2~3次,每次5min,去除丽春红染料,进行后续的实验。

注意事项
1. 染液用量依膜大小而定,不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。


说明书:

丽春红染色液(1×) 货号:               P6176  规格:               100 mL P6176    

通用型总 RNA 抽提试剂 货号: U7431 规格: 100 mL

通用型总 RNA 抽提试剂

产品货号: U7431

产品规格: 100 mL

目录价(元):376

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产品概述:

储存条件:避光保存于室温,有效期见外包装

 

产品介绍

通用型总RNA抽提试剂是一款类似于TRIzol的一步法分离总RNA的试剂,适用于从细胞、组织、细菌及酵母等样本中快速分离总RNA。通用型总RNA抽提试剂有效裂解样本并抑制RNase活性,加入氯仿萃取分层,分为上层水相(含RNA),中间层和下层有机相,异丙醇和75%乙醇沉淀和洗涤得到纯度高的总RNA,整个实验过程操作简单,提取过程大约1 h。抽提得到的总RNA可用于Northern BlotPolyA RNA富集、体外翻译、RNase保护分析、反转录等下游实验。本品含有苯酚,如不慎接触皮肤,应立即用大量流水冲洗。

 

注意事项

1.提取RNA前,需要将工作台面用75%乙醇擦拭干净,操作期间必须佩戴手套和口罩,防止RNase污染。

2.因试剂中含有苯酚等有毒物质,操作时注意佩戴口罩,手套,实验服。

3RNA易降解,操作前请按照说明书自备器材。 

4.建议样本尽量使用新鲜样本或者低温冻存的样本。


说明书:

通用型总 RNA 抽提试剂 货号:               U7431  规格:               100 mL U7431    

NucGreen (2 mM in DMSO) 货号: DN0012 规格: 1mL

NucGreen (2 mM in DMSO)

产品货号: DN0012

产品规格: 1mL

目录价(元):2080

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产品概述:

产品规格1 mL


储存条件:2~8避光保存,有效期见外包装


应用范围:核酸染色


产品参数

Ex/Em (DNA bound) = 503/530 nm

 

产品介绍

NucGreen是一种膜渗透性的DNA染料。染料优先与dsDNA结合并发出绿色荧光,这种染料很适合用来染色活细菌,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都可进行染色。与SYBR系列染料不同,NucGreen是非常稳定的,它可以在室温下进行常规的处理和储存,而不会被降解。用NucGreen染色的细菌可以通过荧光显微镜和流式细胞仪进行检测。

NucGreen (2 mM in DMSO) 货号:               DN0012  规格:               1mL

                                                            . NucGreen 的吸收和发射光谱


注意事项

1.荧光染料存在淬灭性,请注意避光,以减缓荧光淬灭

2.为了你的健康着想,在实验时请佩戴一次性手套和实验服


说明书:

NucGreen (2 mM in DMSO) 货号:               DN0012  规格:               1mL DN0012    

Super Palred 核酸染料, 10,000× in water 货号: S2044S/S2044L 规格: 0.1 mL/0.5 mL

Super Palred 核酸染料, 10,000× in water

产品货号: S2044S/S2044L

产品规格: 0.1 mL/0.5 mL

目录价(元):122/503

其他品牌同类产品

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产品概述:

产品规格0.1 mL0.5 mL


储存条件:室温避光保存,有效期见外包装


应用范围:核酸电泳


产品介绍

Super Palred是一种独特的油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内。不易挥发升华,人体不会吸入,是一种安全无毒

的核酸染料。Super PalredEB具有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置(普通紫外凝胶透射仪),在300 nm处紫外光激发检测即可。Super Palred适用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的dsDNAssDNA 以及RNA染色,可以选择胶染法或泡染法进行染色,使用非常方便、灵活。

 

注意事项

1.若大分子条带拖尾且分离不理想,建议减少DNA marker或核酸样本的上样量。

2.胶染法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。

3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4.本产品仅作科研用途。


说明书:

Super Palred 核酸染料, 10,000× in water 货号:               S2044S/S2044L  规格:               0.1 mL/0.5 mL S2044S/S2044L    

GelstainRedTM 核酸染料, 10,000× in water 货号: S2009S/S2009L 规格: 0.1 mL/0.5 mL

GelstainRedTM 核酸染料, 10,000× in water

产品货号: S2009S/S2009L

产品规格: 0.1 mL/0.5 mL

目录价(元):122/503

推荐仪器:紫外凝胶成像仪(主推)、蓝光切胶仪

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产品概述:

储存条件

室温保存,有效期见外包装。

 

产品介绍

GelstainRedTM是一种高灵敏、无致突变性超安全和超稳定的荧光核酸凝胶染色试剂(在工作浓度中)。它可替代溴化乙锭(EtBrEB),具有远高于EB的灵敏度,同时不需要脱色。GelstainRedTMEB有相同的光谱特性,它替代EB不需要更换成像系统。

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. TAETBE导电性能存在差异,如需缩短电泳时间,可选用TAE电泳缓冲液。

3. 染料无需低温冷藏,请于室温下储存,以避免沉淀,若发现沉淀,请将染料加热至45-50℃2 min,振荡溶解,不影响使用效果。

4. 本产品可以用来染色单链DNARNA,但它对单链DNARNA的灵敏度低于双链DNA


说明书:

GelstainRedTM 核酸染料, 10,000× in water 货号:               S2009S/S2009L  规格:               0.1 mL/0.5 mL S2009S/S2009L    
MSDS:

MSDS S2009 GelstainRedTM, 10,000× in water

客户使用反馈:

GelstainRedTM 核酸染料, 10,000× in water 货号:               S2009S/S2009L  规格:               0.1 mL/0.5 mL GelstainRed 致突变测试检测报告      GelstainRedTM 核酸染料, 10,000× in water 货号:               S2009S/S2009L  规格:               0.1 mL/0.5 mL GelstainRed 水生动物安全性检测报告

*UElandy此产品知识产权与工艺均来自苏州宇恒生物科技有限公司。


常见问题解答:

DNA条带迁移率受到影响?

1.为安全而设计的分子量较大的高效亲和型染料,在凝胶电泳中它们会影响DNA的迁移,建议用泡染法(后染)代替胶染法(前染)。
2.高分子量的DNA在低百分比的琼脂糖凝胶中的分离效果比较好,建议制百分比浓度小的琼脂糖凝胶。
3.TBE缓冲液的缓冲能力比TAE缓冲液的效果更好,建议更换电泳缓冲液。 

为什么我看到的荧光弱,时间久了染料性能会降低,或者后染染色后有一层染料在胶上?
1. 染料可能从溶液中沉淀出来,建议将溶液加热至45-50℃,保持2分钟,然后涡旋溶解。后期在室温下储存染料以避免沉淀。
2. 凝胶的高背景染色可能是琼脂糖质量较差,琼脂糖中的污染物可能与染料结合,导致背景增加。

用哪些仪器检测?
Super Page GelstainRed可以用紫外透射仪(254nm)
GelstainRed完美兼容标准紫外透射成像仪(302或312nm)。
Gelblue兼容紫外和蓝光,蓝光较优。

后染法染色液可以重复使用吗?
可以。但是,如果灵敏度降低,请使用新鲜的染料溶液。

是否与克隆、连接和测序等下游应用兼容?
是。

我应该在我的6×DNA loading buffer中加入多少染料 ?
不建议将染料直接添加到上样缓冲液中,因为这会导致条带迁移不准确。 UE提供6×GelstainRed Prestain上样缓冲液(S2006)产品,可以直接使用,若需要精确确定DNA大小,建议使用后染法。

检测下限是多少?
能够检测至少1 ng DNA的条带。 但是,染色的灵敏度取决于仪器功能和曝光设置。

前染胶是否可以重复电泳?
不建议,信号会随着后续电泳减弱。


使用本产品的文献:

1.Chemical Control of CRISPR Gene Editing via Conditional Diacylation Crosslinking of Guide RNAs

Huajun Lei, Tianying Zeng, Xiaofang Ye, Ruochen Fan, Wei Xiong, Tian Tian, and Xiang Zhou    https://doi.org/10.1002/advs.202206433

应用方向:核酸检测

Super GelBlueTM 核酸染料, 10,000× in water 货号: S2019S/S2019L 规格: 0.1 mL/0.5 mL

Super GelBlueTM 核酸染料, 10,000× in water

产品货号: S2019S/S2019L

产品规格: 0.1 mL/0.5 mL

目录价(元):122/503

推荐仪器:蓝光切胶仪(主推)、紫外凝胶成像仪

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产品概述:

储存条件

室温保存,有效期见外包装。

 

产品介绍

Super GelBlueTM是一种灵敏、无致突变性、超安全和超稳定的荧光核酸凝胶染色试剂(在工作浓度中)。它可替代溴化乙锭(EtBrEB)等不安全的核酸染料,且不需要脱色。它可以被488 nm激光激发,可用蓝光切胶仪或蓝光扫描仪直接观察。

由于Super GelBlueTM独特的分子结构,在保证其高安全性和灵敏度的同时,也不会影响DNA条带的迁移。即使DNA上样量很高,也可以获得很好的条带分离效果。

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. 胶染法制备的凝胶为浅橘红色,电泳后,可能出现肉眼观察凝胶颜色不均一的情况(如上半部分胶颜色深,下半部分胶颜色浅),属于正常现象,不影响电泳结果。

3. Super GelBlueTM不仅可用于琼脂糖凝胶电泳,也可用于丙烯酰胺凝胶核酸电泳。

4. Super GelBlueTM适用于蓝光切胶仪和蓝光扫描仪,也可用于紫外凝胶成像系统,但紫外成像条带较暗,推荐使用我司S2009染料。

5. 泡染的染色液可重复使用3次左右,建议将用过的、需要继续使用的染色溶液避光保存。


说明书:

Super GelBlueTM 核酸染料, 10,000× in water 货号:               S2019S/S2019L  规格:               0.1 mL/0.5 mL S2019S/S2019L    
MSDS:

MSDS S2019 Super Gelblue, 10,000× in water

客户使用反馈:

Super GelBlueTM 核酸染料, 10,000× in water 货号:               S2019S/S2019L  规格:               0.1 mL/0.5 mL Super GelBlue 致突变测试检测报告   Super GelBlueTM 核酸染料, 10,000× in water 货号:               S2019S/S2019L  规格:               0.1 mL/0.5 mL Super GelBlue 水生动物安全检测报告
常见问题解答:

DNA条带迁移率受到影响?

1.为安全而设计的分子量较大的高效亲和型染料,在凝胶电泳中它们会影响DNA的迁移,建议用泡染法(后染)代替胶染法(前染)。
2.高分子量的DNA在低百分比的琼脂糖凝胶中的分离效果比较好,建议制百分比浓度小的琼脂糖凝胶。
3.TBE缓冲液的缓冲能力比TAE缓冲液的效果更好,建议更换电泳缓冲液。 

为什么我看到的荧光弱,时间久了染料性能会降低,或者后染染色后有一层染料在胶上?
1. 染料可能从溶液中沉淀出来,建议将溶液加热至45-50℃,保持2分钟,然后涡旋溶解。后期在室温下储存染料以避免沉淀。
2. 凝胶的高背景染色可能是琼脂糖质量较差,琼脂糖中的污染物可能与染料结合,导致背景增加。

用哪些仪器检测?
Super Page GelstainRed可以用紫外透射仪(254nm)
GelstainRed完美兼容标准紫外透射成像仪(302或312nm)。
Gelblue兼容紫外和蓝光,蓝光较优。

后染法染色液可以重复使用吗?
可以。但是,如果灵敏度降低,请使用新鲜的染料溶液。

是否与克隆、连接和测序等下游应用兼容?
是。

我应该在我的6×DNA loading buffer中加入多少染料 ?
不建议将染料直接添加到上样缓冲液中,因为这会导致条带迁移不准确。 UE提供6×GelstainRed Prestain上样缓冲液(S2006)产品,可以直接使用,若需要精确确定DNA大小,建议使用后染法。

检测下限是多少?
能够检测至少1 ng DNA的条带。 但是,染色的灵敏度取决于仪器功能和曝光设置。

前染胶是否可以重复电泳?
不建议,信号会随着后续电泳减弱。

Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒) 货号: S6009S/S6009M/S6009L 规格: 10 mL/100 mL/500 mL

Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒)

产品货号: S6009S/S6009M/S6009L

产品规格: 10 mL/100 mL/500 mL

目录价(元):113/566/1621

推荐仪器:凝胶成像仪

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产品概述:

储存条件
4℃密封避光保存,短期可放置于室温。有效期见外包装。


组分

规格

S6009S10mL

S6009M100mL

S6009L500mL

A

5 mL

50 mL

250 mL

B

5 mL

50 mL

250 mL

产品介绍
Super ECL Plus 免疫印迹底物是增强型化学发光(ECL)过氧化物酶的底物,可帮助用户在免疫印迹分析过程中实现低表达或高价值蛋白的检测。
Super ECL Plus 底物可为使用辣根过氧化物酶(HRP)偶联物的免疫印迹实验提供明亮的信号,对低表达或高价值蛋白检测灵敏度很高。该 ECL 底物能够兼容各种膜、封闭液和宽范围抗体稀释液,以出色性能、通用性和高性价比,满足用户的免疫印迹应用需求。
Super ECL Plus(超敏)特点:
1. 具有极高灵敏度:检测硝化纤维素膜或 PVDF 膜上低表达或高价值的蛋白条带;
2. 长信号持续时间:条件优化的情况下,经底物孵育的印迹条带能够持续输出 6 至 8 h 的可检测光信号;
3. 价格经济:配方经过优化,适用于浓度极低的抗体检测。• 0.2-1 μg/mL 一抗(或 1 mg/mL 的稀释 1:1,000-1:5,000) • 10-50 ng/mL 二抗(或 1 mg/mL 的稀释 1:20,000-1:100,000)

注意事项
1. 发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能有降低,操作时注意避光。戴手套可以避免在膜上留下手印。
2. 长时间曝光会加深背景;蛋白过量,会使条带强弱变化
失去线性关系;曝光不足,则条带模糊或较浅。
3. 如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 曝光。
4. 使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。
5. NaN3 会抑制 HRP 活性,回收二抗应避免使用 NaN3,如必需使用勿超过 0.01%。

说明书:

Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒) 货号:               S6009S/S6009M/S6009L  规格:               10 mL/100 mL/500 mL S6009S/S6009M/S6009L    
MSDS:

MSDS S6009 Super ECL Plus
使用本产品的文献:

1.CtIP promotes G2/M arrest in etoposide‐treated HCT116 cells in a p53‐independent manner
Hongyu Chen,Jin Shan,Dandan Chen,Ruoxi Wang,Wenjing Qi,Hailong Wang,YUEshuang Ke,Wenguang Liu,Xianlu Zeng
Journal of cellular physiology(2018)

2.Meningitic Escherichia coli-induced upregulation of PDGF-B and ICAM-1 aggravates blood-brain barrier disruption and neuroinflammatory response
Rui-Cheng Yang,Xin-Yi Qu,Si-Yu Xiao,Liang Li,Bo-Jie Xu,Ji-Yang Fu,Yu-Jin Lv,Nouman Amjad,Chen Tan,Kwang Sik Kim,Huan-Chun Chen andXiang-Ru WangJournal of Neuroinflammation(2019 16:101)

3.Melatonin enhances thrombopoiesis through ERK and Akt activation orchestrated by dual adaptor for phosphotyrosine and 3‐phosphoinositides
Shilei Chen,Yan Qi,Song Wang,Yang Xu,Mingqiang Shen,Mengjia Hu,Changhong Du,Fang Chen,Mo Chen,Yukai Lu,Zihao Zhang,Yong Quan,Cheng Wang,Fengchao Wang,Junping Wang
J Pineal Res

4.LncRNAs activate longevity regulation pathway due to aging of Leydig cells caused by DEHP exposure: A transcriptome-based study
Yuhao Wu,Junke Wang,Tianxin Zhao,Yuexin Wei,Lindong Han,Lianju Shen,Chunlan Long,Shengde Wu,Guanghui Wei
Ecotoxicology and Environmental Safety

5.Propionate and butyrate produced by gut microbiota after probiotic supplementation attenuate lung metastasis of melanoma cells in mice
Lili Chen,Xinyu Zhou,Yawei Wang,Dake Wang,Yueshuang Ke,Xianlu Zeng
Molecular Nutrition & Food Research

6.Orientin mediates protection against MRSA-induced pneumonia by inhibiting Sortase A

Li Wang Shisong JingHan QuKai WangYajing JinYing DingLin YangHangqian Yu Yan Shi Qianxue Li Dacheng Wang
Virlence Volime 12

7.Single-Base Resolution Mapping Reveals Distinct 5-Formylcytidine in Saccharomyces cerevisiae mRNAs
Yafen WangZonggui ChenXiong ZhangXiaocheng WengJikai DengWei YangFan WuShaoqing HanChao XiaYu ZhouYu ChenXiang Zhou
ACS Chemical Biology

FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号: F6012S/F6012M/F6012L 规格: 10T/50T/100T

FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒

产品货号: F6012S/F6012M/F6012L

产品规格: 10T/50T/100T

目录价(元):220/737/1244

推荐仪器:流式细胞仪(主推)、荧光显微镜

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产品概述:

产品内容:

组分

  F6012S10T

  F6012M50T

  F6012L100T

   A. 1× Annexin V 结合缓冲液

10 mL

50 mL

50 mL×2

B. FITC-Annexin V

50 μL

250 μL

500 μL

C. PI

100 μL

500 μL

1 mL

储存条件
4℃避光冷藏,请勿冻存。有效期见外包装。

光谱特性
FITC-Annexin V: Ex/Em = 494/518 nm
PI: Ex/Em = 535/617 nm (with DNA)

产品介绍

FITC-Annexin V/PI凋亡试剂盒提供了一种快速简便的方法,通过标记早期凋亡细胞(绿色)和坏死或晚期凋亡的细胞(红色)检测细胞凋亡水平。产品可以使用流式细胞仪或其它荧光检测设备进行检测。
Annexin V(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,可于磷脂酰丝氨酸(PS)选择性结合。磷脂酰丝氨酸(PS)主要分布在细胞膜内侧,即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期,不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面,暴露在细胞外环境中。此时,使用绿色荧光探针FITC标记的Annexin V,即FITC – Annexin V,与外翻的磷脂酰丝氨酸(PS)结合,就可用流式细胞仪或荧光显微镜直接检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。对于坏死或晚期凋亡的细胞,由于细胞完整性已经被破坏,FITC – Annexin V则可以进入胞浆与处于磷脂层内侧的PS结合,从而也使坏死细胞呈现绿色荧光。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种DNA结合染料,它可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞的细胞核。PI可以由488、532或546 nm的激光激发,呈现红色荧光。

注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 为降低细胞凋亡进程,孵育过程可在冰上操作,但孵育时间至少延长至30 min。
3. 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后 1 h之内进行分析。
4. 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI 摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与 FITC-Annexin V的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用 EDTA,EDTA 会影响 Annexin V 与 PS 的结合。
5. 贴壁细胞用胰蛋白酶消化后,建议在最佳培养条件和培养基中恢复约30 min后染色,避免假阳性。
6. 为了避免洗涤细胞时损失细胞,在吸液时可以用大的 Tip 头套上小的 Tip 头吸液。
7. 染料的最佳使用浓度由具体实验要求确定。
8. 荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
9. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号:               F6012S/F6012M/F6012L  规格:               10T/50T/100T F6012S/F6012M/F6012L    
MSDS:

MSDS F6012 FITC-Annexin V&PI
常见问题解答:

为何染色结果显示细胞凋亡率过高?

1. 凋亡时间处理过长,使细胞全部死亡。建议重新摸索细胞凋亡条件,使细胞处于不同的凋亡状态。
2. 对于贴壁细胞,胰蛋白酶消化时间过长或机械刮擦细胞会暂时破坏质膜,使Annexin V能够与细胞膜胞内面上的磷脂酰丝氨酸结合,导致假阳性染色。建议在胰蛋白酶消化或机械刮擦细胞后,让细胞在最佳细胞培养条件和培养基中培养约30分钟,以恢复其膜完整性。

实验结果使用什么仪器观察?
实验结果可以通过流式细胞仪和荧光显微镜进行观察,但更推荐使用流式细胞仪。因为正常的细胞和凋亡的细胞膜上都有磷脂酰丝氨酸(PS),只是凋亡细胞膜外更多,可以结合更多的Annexin V,流式细胞仪更灵敏,可以区分出微小差异,将正常细胞与凋亡细胞分成不同的两群,但如果用荧光显微镜,可能观察不到这一差别,尤其是贴壁细胞。若要在成像测定中检测细胞凋亡,推荐使用SuperView™ 488 Caspase-3 Assay Kit for Live Cells。

流式细胞仪检测细胞凋亡,结果图中的各个象限代表什么状态的细胞?
左上角:Annexin V-/PI+,机械损伤细胞;右上角: AnnexinV+/PI+,晚期凋亡细胞或坏死;右下角:AnnexinV+/PI-,早期凋亡细胞;左下角:AnnexinV-/PI-,正常细胞。

这款试剂盒可同时检测出凋亡率和细胞周期分布吗?
不可以。检测细胞凋亡时PI结合的是核酸,包括DNA和RNA。而PI用于检测细胞周期时需要只结合DNA,由于RNA的干扰,用细胞凋亡检测试剂盒测出来的细胞周期不准。同时,凋亡检测与周期检测时PI的工作浓度以及样本处理都不一样。 如果需要进行细胞周期检测,推荐Cell Cycle and Apoptosis Kit(C6031)

各象限代表的细胞状态问题?
Q1:(AnnexinV-染料)-/PI+,此区域的细胞为坏死细胞。也可能有少数的晚期凋亡细胞在其中,甚至机械损伤的细胞也包含其中。Annexin V-/PI+越多,实验结果越不可信,建议实验中尽量控制这一象限细胞比例。
Q2: (AnnexinV+染料)+/PI+,此区域的细胞为晚期凋亡细胞或坏死。
Q3:(AnnexinV-染料)+/PI-,此区域的细胞为早期凋亡细胞。
Q4:(AnnexinV-染料)-/PI-,此区域的细胞为活细胞。

FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号:               F6012S/F6012M/F6012L  规格:               10T/50T/100T


假阳性问题?

1. 消化液中含有EDTA或消化时间过长引起的假阳性。Annexin V和PS的结合需要Ca2+,而EDTA是Ca2+螯合剂,使用含有EDTA的胰酶会造成假阴性。其次消化时间不宜过长,吹打细胞要轻柔,因为胰酶的过度消化和机械损伤都会引起细胞膜的损伤,造成假阳性。细胞消化下来后,建议在培养箱中在孵育30min,使细胞膜恢复完整性,避免假阳性,或者将细胞报讯在含2% BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
2. 如果样品来源于血液,必须去除血液中的血小板,因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,干扰实验结果。建议:可以含有EDTA的缓冲液200g离心去除血小板, 最后细胞多洗几遍,减小EDTA螯合钙离子产生的影响。
3. 神经细胞膜容易破坏外翻,导致假阳性,所以Annexin V/PI 双染法流式检测细胞凋亡不适用于神经细胞。
4. 诱导时间过长。一般情况下诱导几个小时就可以出现早期凋亡,因此通常不需要处理大于48小时以上,诱导时间过长会使营养物质耗尽,导致细胞状态差,假阳性结果偏高。

荧光染料选择的问题?
1. 实验样本是否带荧光,因为感染病毒或质粒转染的细胞往往带GFP荧光,GFP与YF488/FITC通道重叠,不能选择YF488/FITC标记的Annexin V,此时如果只有488 nm一根激光管可以用PE标记Annexin V,用7-AAD代替PI,若有633 nm激光管,可以改用YF647 Annexin V代替YF488。
2. 如果流式细胞仪带有488 nm和633 nm两个或以上激光管,首先考虑用APC或YF647标记 Annexin V,因为它和PI通道几乎不用考虑光重叠问题,可以减少调节补偿的烦恼,如果只有488 nm激光管则可选择YF488/FITC标记的Annexin V。
3. 处理因素是否带有荧光,本实验室就碰到过一个促凋亡药物Doxorubicin本身发红色荧光,对PI通道的检测造成严重干扰,而且浓度越大干扰越明显。这时建议选用A6079或Y6102 。

圈门问题?
1.要特别注意在FSC/SSC圈门时,所选细胞范围会对结果造成较大影响,所以在分析数据时,要把所有细胞都圈进FSC/SSC的门内,这样实验结果才会更可信。如图,使细胞群大概位于对角线上,并且细胞群较集中,群内细胞比例要在80%以上,如果细胞全部圈入,细胞比例才50%或者更低,说明细胞被压在了坐标轴上,这时要重新调节FSC和SSC。
2.贴壁细胞做Annexin V凋亡检测,通常分群不太规则,这时我们可以根据不加药细胞来画不规则的十字门。如上面图形的设门方式:
FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号:               F6012S/F6012M/F6012L  规格:               10T/50T/100TFITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号:               F6012S/F6012M/F6012L  规格:               10T/50T/100T

免疫染色与凋亡染色顺序问题?

Annexin V凋亡染色可以和抗体一起对细胞进行染色吗?
可以,但建议Annexin V和其它抗体分开染色。例如Annexin V、PI和CD3、CD8同时标记淋巴细胞,可以先在PBS中标记CD3/CD8后洗去,再在Binding buffer(含钙离子)中标记Annexin V。

这款试剂盒可同时检测出凋亡率和细胞周期分布吗?
不可以。检测细胞凋亡时PI结合的是核酸,包括DNA和RNA。而PI用于检测细胞周期时需要只结合DNA,由于RNA的干扰,用细胞凋亡检测试剂盒测出来的细胞周期不准。同时,凋亡检测与周期检测时PI的工作浓度以及样本处理都不一样。 若果需要进行细胞周期检测,推荐Cell Cycle and Apoptosis Kit(C6031)

固定、冷冻、切片或解离的组织,还可以做流式细胞分析吗?
不建议做流式细胞分析。因为流式细胞分析要求细胞分散、单个,活性好,这些状态下的样本外膜上的PS及膜的完整性都受到了影响,因此无法依赖膜的完整性区分健康细胞和凋亡细胞。组织在冻存、复温的过程中会有大量的细胞死亡,同时经过这一过程的组织在分离成单个细胞的时候会形成许多细胞碎片,不宜上流式检测,所以用于流式检测的标本最好是新鲜标本,即取材后立即检测,效果最好。 液氮保存的组织块,可以将组织标本进行切片,然后做原位染色,观察组织细胞的凋亡。

Annexin V可以用在植物和细菌中吗?
Annexin V也可以用在植物和细菌中检测凋亡,具体实验步骤可参考相关文献。
使用本产品的文献:

1.MTP18 overexpression contributes to tumor growth and metastasis and associates with poor survival in hepatocellular carcinoma
Zhang, Yu Li, Hui Chang, Hulin Du, LixUE  Hai, Jun Geng, Xilin Yan, Xiang
cell death and disease(2018) 
应用方向:流式细胞仪检测:SMMC7721和 HLF 细胞的凋亡

2.
MS-275对食管鳞癌KYSE-70细胞存活、凋亡、细胞周期以及迁移的影响
刘腾飞,周建康,黄团结,王亚苹,周馨魁,张 乐,张璐玉,陈一豪,刘红涛,关方霞,马珊珊
郑州大学学报(医学版)(2018) 5 547-552
应用方向:流式细胞仪检测:食管鳞癌KYSE-70细胞的凋亡

3.
Histone deacetylases inhibitor MS‐275 suppresses human esophageal squamous cell carcinoma cell growth and progression via the PI3K/Akt/mTOR pathway
Shanshan Ma  Tengfei Liu  Ling Xu  Yaping Wang  Jiankang Zhou  Tuanjie Huang  Peng Li  Hongtao Liu Yanting Zhang  Xinkui Zhou  Yuanbo Cui  Xingxing Zang  Yuming Wang  Fangxia Guan
Journal of Cellular Physiology (23 May 2019)
应用方向:细胞凋亡检测:食管鳞状癌细胞(ESCC)

4.
SDHC-related deficiency of SDH complex activity promotes growth and metastasis of hepatocellular carcinoma via ROS/NFκB signaling
JibinLi,NingLiang,XiaoyuLong,JingZhao,JinYang,XiaohongDu,TaoYang,PengYuan,XiaojunHuang,JianshengZhang,XianliHe,JinliangXing
Cancer Letters Volume 461, 1 October 2019, Pages 44-55
应用方向:细胞凋亡检测::肝细胞癌(HCC)

5.
MTFP1 overexpression promotes the growth of oral squamous cell carcinoma by inducing ROS production
Tingying Xiao,Jian Sun,Zhankui Xing,Fuqiang Xie,Lan Yang,Wenjuan Ding
CELL BIOLOGY INTERNATIONAL
应用方向:细胞凋亡检测:口腔鳞状细胞(OSCC)

6.ALG-2 couples T cell activation and apoptosis by regulating proteasome activity and inflUEncing MCL1 stability
Tian-Sheng He, Wangsheng Ji, Junqi Zhang, Jing Lu,Xinqi Liu 
Cell Death & Disease(11, Article number: 5 (2020))

7.Over‐expression of TFB2M facilitates cell growth and metastasis via activating ROS‐Akt‐NF‐κB signaling in hepatocellular carcinoma
Xilin Geng,Zhimin Gen,Hui Li,Yu Zhang,Jibin Li,Hulin Chang
liver international

8.CRIF1 overexpression facilitates tumor growth and metastasis through inducing ROS/NFκB pathway in hepatocellular carcinoma
Hulin Chang,Juntang Li,Kai Qu,Yong Wan,Sinan Liu,Wei Zheng,Zhiyong Zhang,Chang Liu
 Cell Death & Disease volume 11, Article number: 332 (2020) 

9.Caffeine Targets G6PDH to Disrupt Redox Homeostasis and Inhibit Renal Cell Carcinoma Proliferation
Huanhuan Xu,Lihong Hu, Titi Liu1, Fei Chen, Jin Li, Jing Xu, Li Jiang, Zemin Xiang, Xuanjun Wang,Jun Sheng
Frontiers in Cell and Developmental Biology

10.A Network Pharmacology Approach to Investigate the Anticancer Mechanism and Potential Active Ingredients of Rheum palmatum L. Against Lung Cancer via Induction of Apoptosis
Qing Zhang, Jia Liu, Ruolan Li, Rong Zhao, Mengmeng Zhang, Shujun Wei, Dong Ran, Wei Jin, Chunjie Wu
Frontiers in Pharmacology

11.MIEF2 over-expression promotes tumor growth and metastasis through reprogramming of glucose metabolism in ovarian cancer
Shuhua Zhao, Xiaohong Zhang, Yuan Shi, Lu Cheng, Tingting Song, Bing Wu, Jia Li & Hong Yang
Journal of Experimental & Clinical Cancer Research

12.Repurposing Erythrocytes as a “Photoactivatable Bomb”: A General Strategy for Site-Specific Drug Release in Blood Vessels
Ya-Xuan Zhu,Hao-Ran Jia,Yuxin Guo,Xiaoyang Liu,Ningxuan Zhou,Peidang Liu,Fu-Gen Wu
Small

13.Multienzyme-like Reactivity Cooperatively Impairs Glutathione Peroxidase 4 and Ferroptosis Suppressor Protein 1 Pathways in Triple-Negative Breast Cancer for Sensitized Ferroptosis Therapy
Ke Li, Chuanchuan Lin, Menghuan Li, Kun Xu, Ye He, Yulan Mao, Lu Lu, Wenbo Geng, Xuemin Li, Zhong Luo, Kaiyong Cai
ACS Nano

14.A multiple functional supramolecular system for synergetic treatments of hepatocellular carcinoma
LijingSun, LiyuanChen, KeYang, Wei FengDai, YeYang, XiumingCui, BoYang, ChengxiaoWang
International Journalof Pharmaceutics

Firefly Luciferase Assay Kit(萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒) 货号: F6024S/F6024M/F6024L 规格: 50T/200T/5×200T

Firefly Luciferase Assay Kit(萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒)

产品货号: F6024S/F6024M/F6024L

产品规格: 50T/200T/5×200T

目录价(元):619/1415/5129

推荐仪器:化学发光仪、酶标仪或液闪测定仪

大包装询价


产品概述:

储存条件:-20℃保存,有效期见外包装


应用范围:真核基因表达调控研究

产品特点

1. 快速:细胞裂解在10-15 min内完成。

2. 方便:试剂易于配制,样品检测步骤简单。

3. 灵敏:能够检测最低10-20 mol的萤光素酶。

4. 酶的浓度线性范围可达8个数量级。

 

产品组分

组分

F6024S50T

F6024M200T

F6024L5×200T

A. 5×Firefly Luciferase Lysis Buffer

5 mL

20 mL

5×20 mL

B. Firefly Luciferase Assay Buffer

5 mL

20 mL

5×20 mL

C. D-Luciferin

5 mg

5 mg

5×5 mg

产品介绍

真核基因表达调控研究常用的方法是进行报告基因的检测,生物发光法又是报告基因检测最常用的有效手段。萤光素酶能催化底物萤光素的转化,并发射出光子。该产品为萤火虫萤光素酶报告基因在哺乳动物细胞中的表达提供快速、灵敏、稳定的检测方法。能够检测最低10-20 mol的萤光素酶,在10-1410-20 mol的酶浓度范围内呈很好的线性关系。

  

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. 温度会对酶的活性产生影响,因此所有试剂应放置室温后再使用。

3. 如果单管光测定仪测定,每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致。

4. 萤火虫萤光素酶催化的生物发光的最强波长为560 nm

5. 为防止孔间干扰,建议使用白色不透光孔板。

6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

Firefly Luciferase Assay Kit(萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒) 货号:               F6024S/F6024M/F6024L  规格:               50T/200T/5×200T F6024S/F6024M/F6024L    
常见问题解答:

检测的萤光数值很低怎么办?

(1)可能为转染效率低
a.优化转染实验条件,用较易转染的质粒做阳性对照(如转染过表达荧光蛋白质粒);
b.确保转染DNA的质量,可通过酶切或琼脂糖凝胶电泳的方法对DNA质量进行鉴定;
c.选择活性较高,处于指数分裂期的细胞进行转染。
(2)可能为启动子活性低或诱导失败
a.转染后的细胞培养使用特异性诱导启动子的条件;
b.优化细胞的培养条件,提高光素酶的表达量;
c.更换强启动子(如SV40、CMV)。
注:海肾萤光素酶基因作为内对照,其表达应不受时期、部位、环境影响,因此常用组成型表达的TK启动子。
(3)样品裂解效率低
a.细胞培养时间不宜过长,12-36h内最好,长时间培养后,细胞可能会难裂解。
b.加入的裂解液需足量,保证细胞能够充分裂解。
(4)检测过程操作不规范
a.选择合适的检测仪器,能够检测化学发光或者生物发光的仪器都适用于该实验;
b.需加入足量底物,保证底物的饱和,否则会造成检测结果出现很大偏差;
c.室温反应。反应时各个组分(细胞裂解产物,底物工作液等)都需要调整到室温;
d.光素酶的半衰期一般约30min,加完底物后可立即检测,尽量在30min内完成。
(5)底物氧化失效
a.底物避光密封保存,萤火虫荧光素酶底物-20℃保存;海肾光素酶底物推荐-80℃保存;
b.反应工作液建议现用现配。

进行检测的过程中,萤光信号值太高该如何进行调整?
(1) 减少质粒转染量。
(2)细胞样品裂解后,离心取上清后检测或对裂解产物进行稀释后检测。
注:不建议通过减少底物量来降低荧光值,需要保证底物的饱和来反映光素酶真实的表达水平,否则会造成检测结果出现大的偏差。

Cell Cycle and Apoptosis Kit(细胞周期检测试剂盒) 货号: C6031S/C6031L 规格: 50T/100T

Cell Cycle and Apoptosis Kit(细胞周期检测试剂盒)

产品货号: C6031S/C6031L

产品规格: 50T/100T

目录价(元):350/600

推荐仪器:流式细胞仪

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产品概述:

产品内容

组分

C6031S (50T)

C6031L (100T)

A. 染色缓冲液

25 mL

50 mL

B. 碘化丙啶染色液20×

1.25 mL

2 × 1.25 mL

C. RNase A5

0.5 mL

mL

储存条件

-20ºC保存,有效期见外包装。组分B碘化丙啶染色液(20 ×)需避光保存。

产品介绍
细胞周期检测试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Kit)是一种采用经典的碘化丙啶(Propidium Iodide,即PI)染色方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。
碘化丙啶是一种双链DNA的荧光染料。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光,并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定,然后根据DNA含量的分布情况,可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。
碘化丙啶染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片段在染色过程中丢失,因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染,即荧光强度小于1,在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰,即凋亡细胞峰。
细胞发生凋亡时,由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂,产生凋亡小体,使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期,细胞对前向角光散射的能力显著降低,对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期,前向和侧向光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察细胞凋亡情况。
本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测,则必须把组织消化成单细胞状态,才可以进行检测。

注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2. 碘化丙啶对人体有刺激性,请注意适当防护。
3. 碘化丙啶是已知的诱变剂,因此该溶液在丢弃之前需要先经过活性炭处理。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

Cell Cycle and Apoptosis Kit(细胞周期检测试剂盒) 货号:               C6031S/C6031L  规格:               50T/100T C6031S/C6031L    
MSDS:

MSDS C6031 Cell Cycle and Apoptosis Kit
使用本产品的文献:

1.DRP1 upregulation promotes pancreatic cancer growth and metastasis through increased aerobic glycolysis
Jing Liang,Yiping Yang,Lu Bai,Feng Li,Enxiao Li
J Gastroenterol Hepatol.


2.Molecular subtypes based on CNVs related gene signatures identify candidate prognostic biomarkers in lung adenocarcinoma
Baihui LiZiqi HuangWenwen YuShaochuan LiuJian ZhangQingqing WangLei WuFan KouLili Yang
Neoplasia Volume23,Issue 7,July 2021,Page 704-717


3.POZ/BTB and AT hook containing zinc finger 1 (PATZ1) suppresses differentiation and regulates metabolism in human embryonic stem cells

Cuihong Zhao Min Yan Chengjuan Li Zhongtao Feng

International Journal of Biological Sciences

参考文献:
1.An Experimental Analysis of the Molecular Effects of Trastuzumab (Herceptin) and Fulvestrant (Falsodex), as Single Agents or in Combination, on Human HR+/HER2+ Breast Cancer Cell Lines and Mouse Tumor Xenografts
应用方向:周期检测:乳腺癌细胞系ZR-75-1 和 BT-474 


2.Wnt/β-catenin signaling pathway inhibits the proliferation and apoptosis of U87 glioma cells via different mechanisms.
应用方向:周期检测:U87胶质瘤细胞


3.Treatment with a selenium-platinum compound induced T-cell acute lymphoblastic leukemia/lymphoma cells apoptosis through the mitochondrial signaling pathway
应用方向:周期检测:Jurkat和Molt-4细胞


4.Human cytomegalovirus miR-US5-1 inhibits viral replication by targeting Geminin mRNA
应用方向:周期检测:U373细胞


5.shRNA-Mediated EMMPRIN Silencing Inhibits Human Leukemic Monocyte Lymphoma U937 Cell Proliferation and Increases Chemosensitivity to Adriamycin.

应用方向:周期检测:U937细胞


Annexin V-APC 偶联物 货号: A6080S/A6080L 规格: 0.1 mL/1 mL

Annexin V-APC 偶联物

产品货号: A6080S/A6080L

产品规格: 0.1 mL/1 mL

目录价(元):467/3536

推荐仪器:流式细胞仪

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产品概述:

储存条件

4℃避光冷藏,请勿冻存。有效期见外包装

 

光谱特性

Annexin V-APCEx/Em = 650/660 nm

 

产品介绍

Annexin V(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36 KDCa2+依赖性磷脂结合蛋白,可与磷脂酰丝氨酸(PS)选择性结合。磷脂酰丝氨酸(PS)主要分布在细胞膜内侧,即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期,不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面,暴露在细胞外环境中。此时,使用荧光蛋白APC标记的 Annexin V,即 Annexin V-APC,与外翻的磷脂酰丝氨酸(PS)结合,就可用流式细胞仪直接检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。正常细胞不会被Annexin V-APC所染色,发生凋亡或坏死的细胞会被Annexin V-APC所染色。Annexin V-APC可以与部分非渗透性的细胞核染料 ( 7-AAD/PI ) 等联合使用,区分处于不同凋亡时期的细胞。

 

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. 为降低细胞凋亡进程,孵育过程可在冰上操作,但孵育时间至少延长至30 min

3. 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后 1 h之内进行分析。

4. 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI 摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与 Annexin V-APC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用 EDTAEDTA 会影响 Annexin V  PS 的结合。

5. 贴壁细胞用胰蛋白酶消化后,建议在最佳培养条件和培养基中恢复约30 min后染色,避免假阳性。

6. 为了避免洗涤细胞时损失细胞,在吸液时可以用大的 Tip 头套上小的 Tip 头吸液。

7. 染料的最佳使用浓度由具体实验要求确定。

8. 荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

9. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

Annexin V-APC 偶联物 货号:               A6080S/A6080L  规格:               0.1 mL/1 mL A6080S/A6080L    
MSDS:

MSDS A6080 Annexin V-APC

抗荧光淬灭封片剂 货号: A4083 规格: 5 mL

抗荧光淬灭封片剂

产品货号: A4083

产品规格: 5 mL

目录价(元):159

大包装询价


产品概述:

储存条件
4℃避光保存,有效期见外包装;使用前,将其恢复至室温,轻微震荡混匀,避免产生气泡。

产品介绍
抗荧光淬灭封片剂是一种能够减缓荧光淬灭并且固化玻片从而形成永久硬密封的试剂,固化后的玻片无需使用指甲油或其他密封剂密封盖玻片的边缘。

注意事项
1. 抗荧光淬灭封片剂对于染色活细胞膜染料和线粒体染料的抗淬灭效果不佳,建议抗荧光淬灭封片剂用于固定透化的细胞或者组织。
2. 抗荧光淬灭封片剂与我们的YF®488染料搭配时,有可能产生背景干扰,这种情况可能是加入过多本品造成,应尽量减少本品的加入量。
3. 抗荧光淬灭封片剂可能会不适用于某些染料,建议进行预实验测试匹配性。
4. 封片过程中,应避免湿气太重的地方,如果抗荧光淬灭封片剂吸入太多水汽,会影响封片效果。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

说明书:

抗荧光淬灭封片剂 货号:               A4083  规格:               5 mL A4083    
使用本产品的文献:

1.SARS-CoV-2 productively infects human brain microvascular endothelial cells
Rui-Cheng Yang Kun HuangHui-Peng Zhang Liang LiYu-Fei ZhangChen Tan Huan-Chun ChenMei-Lin JinXiang-Ru Wang
Journal of Neuroinflammation

DL10000 DNA Marker 货号: DL2031 规格: 0.5 mL

DL10000 DNA Marker

产品货号: DL2031

产品规格: 0.5 mL

目录价(元):113

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产品概述:

产品规格:0.5 mL (0.09 mg/mL)

 

储存条件

4℃保存,长期保存置于-20℃。避免反复冻融。有效期见外包装。

 

产品介绍

DL 10000 DNA Marker是由8条线状双链DNA条带组成,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析,不建议用于Acrylamide凝胶电泳。本产品为即用型产品,已含有1×Loading Buffer,可根据实验需要,直接上样电泳,使用方便,适用于长片段DNA的判断,电泳图像清晰。

产品含有两种染料(青色染料和黄色染料),会在电泳时分开以监测迁移进度,青色染料在1%的琼脂糖凝胶中与3-5 kb DNA片段的迁移率相同,黄色染料在1%的琼脂糖凝胶中比引物迁移得快(<50 bp)。

 

条带组成

1000 bp2000 bp3000 bp4000 bp5000 bp6000 bp8000 bp10000 bp

 DL10000 DNA Marker 货号:               DL2031  规格:               0.5 mL

DL 10000 DNA Marker图谱

推荐电泳缓冲液

TAE /TBE

 

使用方法

1. 可搭配我司即UE S2009 GelstainRedTM进行电泳,取5 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。如果加样孔较宽,可适当增加上样量,进行电泳。

2. 建议电泳条件为1%琼脂糖凝胶,电压4-10 V/cm 电泳槽正负极距离

3. 通过GelstainRedTM或其他染料进行染色,观察电泳条带。

 

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. 请及时更换电泳缓冲液并使用新制的凝胶,以免影响电泳结果。


说明书:

DL10000 DNA Marker 货号:               DL2031  规格:               0.5 mL DL2031    

1× Tyramide Amplification Buffer(酪胺放大缓冲液) 货号: 60012S/60012L 规格: 2×1 mL/20 mL

1× Tyramide Amplification Buffer(酪胺放大缓冲液)

产品货号: 60012S/60012L

产品规格: 2×1 mL/20 mL

目录价(元):99/599

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产品概述:

储存条件

4℃避光保存,有效期见外包装

 

产品介绍

1× Tyramide Amplification Buffer为即用型缓冲液,主要用于通过酪酰胺信号放大技术对细胞和组织进行的免疫染色。只需在该缓冲液中稀释酪酰胺化合物即可制成工作液。

按每个样品使用100 μL计算,2 mL 1×Tyramide Amplification Buffer可以做20个样品,20 mL可以做200个样品。

 

实验步骤

以下方案针对96孔板中的固定细胞或大小约10 mm×10 mm的组织切片,可以根据样本的大小按比例缩放。

1. 根据样本和抗体执行相应的固定、封闭和抗体标记的步骤。样品必须用抗体或链霉亲和素耦合的HRP结合物标记。我们建议使用我司酪酰胺信号放大试剂盒进行最佳的封闭和二抗标记。

2. 抗体(链霉亲和素)-HRP结合物标记后,用洗涤缓冲液1×PBS洗涤样品3次,每次5 min

3. 1× Tyramide Amplification Buffer将染料酪酰胺探针制成工作溶液。染料酪酰胺探针的终浓度可以根据具体应用而改变。向96孔板的每个孔中或每个组织切片上加入100 μL工作液。工作溶液可在室温下避光保存长达24 h

4. 室温避光孵育10 min

5. 用洗涤缓冲液1×PBS洗涤样品3次,每次5 min

6. 可选:如果使用Biotin-酪酰胺,可使用荧光标记的链霉亲和素进行荧光显色,也可使用含HRP的链霉亲和素标记,后使用DAB显色。

7. 显微镜成像。对于载玻片上的组织样本,请盖上盖玻片并密封后,再显微镜成像。

 

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。


说明书:

1× Tyramide Amplification Buffer(酪胺放大缓冲液) 货号:               60012S/60012L  规格:               2×1 mL/20 mL 60012S/60012L    
MSDS:

MSDS 60012 1×Tyramide Amplification Buffer

PAGE 彩色快速凝胶制备试剂盒(10%) 货号: S6171S/S6171 规格: 10 gels/125 gels

PAGE 彩色快速凝胶制备试剂盒(10%)

产品货号: S6171S/S6171

产品规格: 10 gels/125 gels

目录价(元):36/375

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产品概述:

储存条件
A-D组分4℃保存,E组分-20℃保存,有效期见外包装

产品组分

组分

规格

10 gels

125 gels

A. 上层胶溶液(

8 mL

80 mL

B. 彩色上层胶缓冲液(

8 mL

80 mL

C. 10%下层胶溶液(

30 mL

250 mL

D. 下层胶缓冲液(

30 mL

250 mL

E. 改良型促凝剂

1 mL

8 mL

产品介绍

PAGE 彩色快速凝胶制备试剂盒(10%)采用预混液形式的配方,制胶时只需加入改良型促凝剂即可,方便快捷。上层胶为彩色(紫色)凝胶,便于点样。本产品制备的凝胶也可用于非变性PAGE胶电泳实验。
本试剂盒配备改良型促凝剂,无TEMED刺激性气味,稳定性好、催化效果佳,制备一块或多块凝胶仅需二十分钟左右。为方便取用,已开盖的改良型促凝剂可置于4℃保存至少3个月。
制胶数量(125 gels):125块(0.75 mm);>90块(1.00 mm);>60块(1.50 mm)

注意事项
1. 本产品制备的上层凝胶对样品没有浓缩效应,类似于预制胶,与传统PAGE胶相比,蛋白条带分离效果更好,小分子蛋白(比如10 kDa)也可以清晰地分离开,且蛋白条带更窄更锐利。
2. 改良型促凝剂的用量可根据个人习惯和经验调整,加入较多的促凝剂可以加速凝胶,反之亦然。同等条件下,温度越高,凝胶速度越快,温度过高时建议适当降低促凝剂的使用量。
3. 使用前胶溶液及缓冲液恢复至室温,可有效避免凝胶过程中气泡的产生。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

凝胶浓度及分离范围参考:

胶浓度

分离范围(kDa

最佳范围(kDa

7.5%

35-250

50-150

10%

20-180

30-100

12.5%

10-150

20-70

15%

8-100

10-50


说明书:

PAGE 彩色快速凝胶制备试剂盒(10%) 货号:               S6171S/S6171  规格:               10 gels/125 gels S6171S/S6171    

Super ECL Prime(灵敏化学发光检测试剂盒) 货号: S6008S/S6008M/S6008L 规格: 10 mL/100 mL/500 mL

Super ECL Prime(灵敏化学发光检测试剂盒)

产品货号: S6008S/S6008M/S6008L

产品规格: 10 mL/100 mL/500 mL

目录价(元):88/486/1253

推荐仪器:凝胶成像仪

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产品概述:

储存条件
4℃密封避光保存,短期可放置于室温。有效期见外包装。

组分

   规格

 S6008S10mL

 S6008M100mL

S6008L500mL

A

5 mL

50 mL

250 mL

B

5 mL

50 mL

250 mL

产品介绍
Super ECL Prime 免疫印迹底物是用于增强型化学发光 (ECL)的入门级过氧化物酶底物,性能可靠,但成本更低,性价比极高。
Super ECL Prime 免疫印迹底物适用于辣根过氧化物酶 (HRP)的检测,该底物采用了与其它品牌相同的鲁米诺和过氧化物酶底物配方,无需对检测条件或孵育方案进行优化,从而大大节约成本。
Super ECL Prime(灵敏)特点:
1. 简单易用;
2. 灵敏度更高:可检测较低表达的蛋白;
3. 价格更经济:相比其他品牌的类似产品,在具有高品质和高性能的同时,价格更低。

注意事项
1. 发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能有降低,操作时注意避光。戴手套可以避免在膜上留下手印。
2. 长时间曝光会加深背景;蛋白过量,会使条带强弱变化失去线性关系;曝光不足,则条带模糊或较浅。
3. 如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 曝光。
4. 由于发光液极其灵敏,强烈推荐大多数进口抗体稀释浓度为一抗 1:1000~1:4000,二抗 1:5000~1:10000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带。
5. 某些保鲜膜可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜。
6. 使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。
7. NaN3 会抑制 HRP 活性,回收二抗应避免使用 NaN3,如必需使用勿超过 0.01%。

说明书:

Super ECL Prime(灵敏化学发光检测试剂盒) 货号:               S6008S/S6008M/S6008L  规格:               10 mL/100 mL/500 mL S6008S/S6008M/S6008L    
MSDS:

MSDS S6008 Super ECL Prime
使用本产品的文献:

Dihydrocapsaicin Inhibits Cell Proliferation and Metastasis in Melanoma via Down-regulating b-Catenin Pathway
Shaomin ShiChongyang LiYanli ZhangChaowei DengWei LiuJuan DuQian LiYacong JiLeiyang GuoLichao LiuHuanrong HuYaling LiuHongjuan Cui

Suggest a Research Topic

Western 免冰浴快速转膜液(10×) 货号: W6174 规格: 500 mL

Western 免冰浴快速转膜液(10×)

产品货号: W6174

产品规格: 500 mL

目录价(元):179

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产品概述:

储存条件

室温保存,有效期见外包装。

 

产品介绍

Western免冰浴快速转膜液(10×)是一种缓冲能力更强、蛋白转膜更彻底、无需冰浴及转膜时间更短的湿转法转膜液。本产品安全无毒,通常30 min可完成转膜过程,且稀释成1× 可重复利用2-3次。

限定稀释成,每次使用1000 mL转膜液进行电转,且重复利用3次情况下,本产品可以使用15次。

 

注意事项

1. 本产品仅限科研使用。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作


说明书:

Western 免冰浴快速转膜液(10×) 货号:               W6174  规格:               500 mL W6174    

Super ECL Star(特超敏化学发光检测试剂盒) 货号: S6010S/S6010L 规格: 10 mL/100 mL

Super ECL Star(特超敏化学发光检测试剂盒)

产品货号: S6010S/S6010L

产品规格: 10 mL/100 mL

目录价(元):175/884

推荐仪器:凝胶成像仪

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产品概述:

储存条件
4℃密封避光保存,短期可放置于室温。有效期见外包装。

组分

规格

S6010S10mL

S6010L100mL

A

5 mL

50 mL

B

5 mL

50 mL

产品介绍
Super ECL Star 最高灵敏度底物是一款具有超高灵敏度的增强型化学发光(ECL)底物,可通过辣根过氧化物酶 (HRP)实现极低表达或高价值蛋白的免疫印迹检测。Super ECL Star 特超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶 HRP 的抗体及其关联的抗原。由于采用了独特的发光底物系统,Super ECL Star 超敏发光液是极度灵敏的荧光 ECL 检测试剂。
Super ECL Star(特超敏)特点:
1. 具有极高灵敏度和高信噪比,使用适当的一抗和二抗时,可在硝化纤维膜或 PVDF 膜上检测极低表达或高价值蛋白的条带;
2. 明亮信号。通过胶片或成像系统曝光,易于捕获图像;
3. 价格经济:配方经过优化,可适用于浓度极低的抗体检测。
• 10 ng-0.2 μg/mL 一 抗 ( 或 1 mg/mL 的 稀 释 1:5,000-1: 100,000)
• 2 ng-10 ng/mL 二 抗( 或 1 mg/mL 的 稀释 1:100,000-1: 500,000)

注意事项
1. 步骤 1~4 可在日光灯下操作,但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低,移到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。
2. 长时间曝光或蛋白过量,将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系,曝光不足则条带模糊。
3. 如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 发光和曝光。
4. 由于特超敏发光液极其灵敏,强烈推荐大多数进口抗体稀释浓度为一抗 1:5000~1:100,000,二抗 1:100,000~ 1: 500,000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带。
5. 某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜。
6. 使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。
7. NaN3 能抑制 HRP 活性,回收第二抗体应避免使用 NaN3,如必需使用勿超过 0.01%。
说明书:

Super ECL Star(特超敏化学发光检测试剂盒) 货号:               S6010S/S6010L  规格:               10 mL/100 mL UE-S6010S/S6010L    
MSDS:

MSDS S6010 Super ECL Star
使用本产品的文献:

1.Porcine epidemic diarrhea virus-induced epidermal growth factor receptor activation impairs the antiviral activity of type I interferon
Lijun Yang, Jiayu Xu, Longjun Guo, Taijie Guo, Lu Zhang, Li Feng ,Hongyan Chen, YUE Wang
journal of virology (2018) DOI: 10.1128/JVI.02095-17

2.
Integrin β1 promotes peripheral entry by rabies virus
Lei Shuai, Jinliang Wang, Dandan Zhao, Zhiyuan Wen, Jinying Ge, Xijun He, Xijun Wang, Zhigao Bu
Journal of virology 

3.Poly(ADP‑ribosyl)ation enhances HuR oligomerization and contributes to pro‑inflammatory gene mRNA stabilization
YUEshuang Ke, XUEping Lv, XingyUE Fu, Jing Zhang, Ameer Ali Bohio, Xianlu Zeng, Wenjing Hao, Ruoxi Wang, Istvan Boldogh & XUEqing Ba
Cellular and Molecular Life Sciences

进口分装胎牛血清(Foetal Bovine Serum) 货号: F9051 规格: 500mL

进口分装胎牛血清(Foetal Bovine Serum)

产品货号: F9051

产品规格: 500mL

目录价(元):9998

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产品概述:

储存条件
-15~-40℃保存,有效期见外包装。

产品介绍

该产品为进口胎牛血清分装,从血液采集到无菌过滤,全程采用一次性无菌闭环加工模式,确保最终产品具有低内毒素和血红蛋白。本产品经过过滤除菌,pH值、渗透压、血红蛋白浓度、总蛋白、总IgG、内毒素等多项指标检测合格,无细菌、支原体、生物化学污染,具有高质量和稳定性,适用于娇贵细胞培养。
本品的原料全部经过牛病毒性腹泻(BVD)初检,检测结果是保证最佳质量和产品批次选择的重要依据。这一检测过程是本产品的独特之处,满足对原材料病毒含量有严格要求的客户需求。

注意事项

1. 血清解冻后应尽快用完,尽量避免反复冻融;如果不能短期内使用完毕,解冻后请适当分装。血清结冰时体积会增加约10%,因此在分装血清时须使分装瓶预留一定体积空间,否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。
2. 血清解冻时应将血清从-15~-40℃的低温冰箱中取出放入4℃冰箱解冻1天,待全部解冻后再分装。解冻过程中请不时摇匀(小心勿造成气泡),使血清成分和温度均匀,从而减少沉淀的产生
3. 切勿直接将血清从-15℃或更低温度进入37℃水浴解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀,从而使用血清的质量下降。
4. 血清中的絮状沉淀物主要是解冻后血清中纤维蛋白及4℃长时间保存后血清中的脂蛋白变性造成的,不会影响血清本身的质量,可不用处理,也可400×g离心5min去除。


说明书:

进口分装胎牛血清(Foetal Bovine Serum) 货号:               F9051  规格:               500mL F9051    
常见问题解答:

这款胎牛血清的试用范围?

适用于一般细胞,肿瘤细胞,部分干细胞等。

如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?
血清解冻时应将血清从-15~-70℃的低温冰箱中取出放入4℃冰箱解冻1天,待全部解冻后再分装。解冻过程中请不时摇匀(小心勿造成气泡),使血清成分和温度均匀,从而减少沉淀的产生。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻,并避免反复冻融。需要长期保存的血清必须储存于-20℃ – 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在 37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会被破坏,而影响血清质量。

有时在血清中见到的絮状沉淀可能是些什么物质?
主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量,可用400 xg离心5 min去除,也可不用处理。

如何避免血清中产生沉淀?
(1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
(2) 血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
(4) 勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。
(5) 血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
(6) 若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。

在使用前是否需要对血清进行过滤?
一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。

自然溶化好的胎牛血清放在室温下一晚还能用吗?
室温不可以,建议4℃保存。

加到培养基中的血清必须灭活吗?
不是必须的,看做什么实验。如果用于培养普通细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子。但是如果用于培养一些表面具有补体受体的细胞,如内皮细胞,血清是需要灭活,一般是56℃,30min。

热灭活对血清的作用是什么?
热灭活步骤能够灭活补体系统。补体会参与以下事件中:溶解细胞事件,平滑肌收缩,肥大细胞与血小板释放组胺,吞噬作用增强,趋化作用,淋巴细胞与巨噬细胞的活化等。

细胞培养 中出现黑点是污染吗?如何处理?
一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。
如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:
(1)细胞生长过老,破碎的细胞残骸;
(2)血清质量不好,反复冻融的结果;
(3)配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;
(4)配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;
(5)培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。

细胞培养中如何防止黑点生成?
(1) 尽可能地减少血清冻融次数。
(2) 培养基无需37℃水浴。
(3) 培养基保持最佳PH值7.0- 7.2。
(4) 严格控制配制培养基的水质,容器定期刷洗。
(5) 掌握细胞传代的最佳时机,细胞切勿生长过老。


使用本产品的文献:

1.“Intercellular Mass Transport” Mimic Enables ASO Entry Completely into the Cell Nucleus for Enhanced Ischemia Therapy

Bin Gao Xiaoyu Wang Meiyu Wang Wen Liu Ying Li Shihai Xia Wencheng Zhang Yakai Feng
acs applied materials & interfaces

抗荧光淬灭剂 货号: A4081 规格: 5 mL

抗荧光淬灭剂

产品货号: A4081

产品规格: 5 mL

目录价(元):139

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产品概述:

储存条件
4℃避光保存,有效期见外包装;使用前,将其恢复至室温,轻微震荡混匀,避免产生气泡。

产品介绍
抗荧光淬灭剂是一种能够减缓荧光淬灭的试剂,可用于大多数的荧光染料中,操作简便,该产品推荐运用于固定透化的细胞或者组织中,观察结束后可使用指甲油或者密封胶密封盖玻片边缘;含 DAPI 的抗荧光淬灭剂可直接进行细胞核染色。

注意事项
1. 抗荧光淬灭剂对于染色活细胞膜染料和线粒体染料的抗淬灭效果不佳,建议抗荧光淬灭剂用于固定透化的细胞或者组织。
2. 抗荧光淬灭剂与我们的 YF 488 染料搭配时,有可能产生背景干扰,这种情况可能是加入过多本品造成,应尽量减少本品的加入量。
3. 抗荧光淬灭剂可能会不适用于某些染料,实验前建议进行预实验测试匹配性。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
说明书:

抗荧光淬灭剂 货号:               A4081  规格:               5 mL A4081    

6×GelstainRed Prestain上样缓冲液 货号: S2006S/S2006M/S2006L 规格: 0.1 mL/1 mL/10 mL

6×GelstainRed Prestain上样缓冲液

产品货号: S2006S/S2006M/S2006L

产品规格: 0.1 mL/1 mL/10 mL

目录价(元):59/221/1547

推荐仪器:紫外凝胶成像仪(主推)、蓝光切胶仪

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产品概述:

储存条件

4℃避光保存,有效期见外包装。

 

产品介绍

GelstainRed是一款非常灵敏、稳定,且安全无毒的新型核酸染料,它可以完全替代高诱变性的EB6× GelstainRed Prestain上样缓冲液是一款包含示踪染料以及GelstainRed的凝胶Loading Buffer。这款预染缓冲液包含两种蓝色电泳示踪染料,在1%的琼脂糖凝胶中,分别指示1.5 Kb200 bp的电泳条带。该产品可以直接与DNA样品混合后上样,进行凝胶电泳实验,无需提前在配制琼脂糖凝胶中加入核酸染料,因此更加方便快捷。

GelstainRedEB具有几乎相同的光谱,因此GelstainRed可以在不改变现有成像系统的条件下代替EB。此外,GelstainRed还可兼容基因测序和克隆等下游一系列操作。使用商业化的DNA凝胶提取试剂盒、或者采用酚/氯仿抽提法、乙醇沉淀法等可以有效去除与DNA结合的GelstainRed

 

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. TAETBE导电性能存在差异,如需缩短电泳时间,可选用TAE电泳缓冲液。

3. 电泳时电压不宜过高,一般为120 V左右,但具体条件视不同实验室而定。

4. 当上样浓度较大时,该产品也可以达到较理想的效果。


说明书:

6×GelstainRed Prestain上样缓冲液 货号:               S2006S/S2006M/S2006L  规格:               0.1 mL/1 mL/10 mL UE-S2006S/S2006M/S2006L    
MSDS:

MSDS S2006 6× GelstainRed Prestain Loading Buffer
常见问题解答:

条带模糊弯曲?

严格将样品与染料按照说明书中的比例预混,禁止染料与DNA随机预混上样。

条带暗淡?
1.核酸浓度过低,增加上样量。
2.核酸降解,使用不含核酸酶的试剂和耗材制备样本。


使用本产品的文献:

1.苏云金芽孢杆菌几丁质酶Chi73的特性及生物活性研究
刘佳 宋萍 张杰 南宫自艳 王勤英
河北农业大学学报(2019年04期)

2.西尼罗病毒E蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备
张颖 曹增国 李恩涛 李国华 闫飞虎 莫若 李武健 迟航 王化磊 冯娜 高玉伟 杨松涛 赵永坤 夏咸柱
中国兽医科学

3.Complete genome and molecular characterization of genotype VII velogenic Newcastle disease virus isolated in Chin
Lingzhai Meng, Shan Zhang, Xiaoran Guo, Rana Waseem Akhtar, Syed Aftab Hussain Shah, Kuan Zhao, Wanzhe Yuan
Acta Virologica Vol.65, No.2, p.149-159, 2021

Super Page GelstainRedTM核酸染料, 10,000× in water 货号: S2005S/S2005L 规格: 0.1 mL/0.5 mL

Super Page GelstainRedTM核酸染料, 10,000× in water

产品货号: S2005S/S2005L

产品规格: 0.1 mL/0.5 mL

目录价(元):122/503

推荐仪器:紫外凝胶成像仪(主推)、蓝光切胶仪

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产品概述:

储存条件

室温避光保存,有效期见外包装。

 

产品介绍

Super Page GelstainRedTM核酸染料是一种专门染色Acrylamide凝胶DNA的无毒、无诱变性的红色核酸染料。可以使用配置了EB滤光器的254 nm紫外透射仪呈像。使用商业化的DNA凝胶提取试剂盒、或者采用酚/氯仿抽提法、乙醇沉淀法等可以有效去除与DNA结合的Super Page GelstainRedTM核酸染料。Super Page GelstainRedTM核酸染料染色dsDNA的灵敏度是RNA6-8倍。

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

Super Page GelstainRedTM核酸染料, 10,000× in water 货号:               S2005S/S2005L  规格:               0.1 mL/0.5 mL UE-S2005S/S2005L    
常见问题解答:

可以用于RNA吗?

可以,但是染料对双链DNA的灵敏度是RNA的6-8倍

可以用于琼脂糖跑胶吗?
该款主要用于PAGE胶,如果用于琼脂糖凝胶则需使用泡染法,不能使用前染法或点染法。


使用本产品的文献:

1.基于产量相关性状 SSR 分子标记的大豆杂种优势群划分
雷蕾
作物杂志

Biolife Green I, 20× in water(荧光定量PCR级染料) 货号: S2017 规格: 1 mL

Biolife Green I, 20× in water(荧光定量PCR级染料)

产品货号: S2017

产品规格: 1 mL

目录价(元):147

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产品概述:

储存条件

4℃避光保存,有效期见外包装。使用时应避免反复冻融,建议分装成小管冻存。

 

产品介绍

Biolife Green I效能等同于Sybr Green I

Biolife Green I是一种结合于dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发光的荧光染料。Biolife Green IdsDNA结合后荧光信号会增强800-1000倍,是一种常用的qPCR荧光染料。该染料经济实惠、使用方便,具有高灵敏度与高信噪比等优势,可应用于基因表达差异分析,基因芯片等。

注意事项

1. Biolife Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功的关键因素。染料浓度过低会使荧光信号变化降低,导致低拷贝的样品可能无法检出,而在高浓度时又会抑制PCR反应。所以一般在使用Biolife Green染料时应根据实际情况优化使用浓度,反应的终浓度为0.2×之间

2. Biolife Green I 荧光染料随着时间的推移可能会在光照下褪色,从而导致敏感性下降,因此在存储和使用过程中要避免强光照射。

3. Biolife Green I 荧光染料应避光存放,原液保存于-20℃;建议分装成小管冻存,短期可以4℃保存。

4. 为了您的健康,请穿实验服并戴一次性手套进行操作


说明书:

Biolife Green I, 20× in water(荧光定量PCR级染料) 货号:               S2017  规格:               1 mL S2017    

Western及IP细胞裂解液 货号: W6001 规格: 100 mL

Western及IP细胞裂解液

产品货号: W6001

产品规格: 100 mL

目录价(元):168

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产品概述:

储存条件

4℃保存,有效期见外包装。

 

产品介绍

WesternIP细胞裂解液(Cell Lysis Buffer for Western and IP),是一种在非变性条件下裂解细胞或组织样品的裂解液,主要成分为25mM Tris-HCl (pH7.4)150mM NaCl1% NP-405% glycerol等,可有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。

本裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用于常规的PAGEWestern、免疫沉淀(Immunol precipitationIP)、免疫共沉淀(Co-IP),以及许多兼容1% NP-40的酶活性或者生物小分子的检测。

UElandy提供的另外一款RIPA裂解液(强,无抑制剂)(R6166),其有效裂解成分为1% Triton X-1001% deoxycholic acid0.1% SDS ,裂解蛋白能力更强。如遇某些难溶解蛋白的Western,发现WesternIP细胞裂解液效果不是非常理想,可以尝试使用裂解强度更高的RIPA裂解液(强,无抑制剂)(R6166)。


注意事项

1. 裂解时需在冰上或4℃进行。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. 本产品仅限科研使用。


说明书:

Western及IP细胞裂解液 货号:               W6001  规格:               100 mL W6001