DiA(细胞膜绿色荧光探针) 货号: D4059 规格: 50 mg

DiA(细胞膜绿色荧光探针)

产品货号: D4059

产品规格: 50 mg

目录价(元):1560

推荐仪器:荧光显微镜

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产品概述:

产品参数
外观:可溶于DMSO的红色固体
Ex/Em (MeOH) = 491/613 nm
CAS号:114041-00-8
分子式:C46H79IN2
分子量:787.0
分子结构图:

DiA(细胞膜绿色荧光探针) 货号:               D4059  规格:               50 mg

储存条件
4℃避光保存,有效期见外包装。

产品介绍

DiA是一种细胞膜绿色荧光染料,它在细胞膜中的扩散速度比DiO快,并且经常和DiI一起使用于细胞膜双色标记。
DiA染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定透化(室温下用0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很好地进行质膜染色。DiA对固定细胞的染色效果比DiO好。
以每次使用100 μL染色工作液,染色工作液浓度10 μM计算,50 mg配置为工作液大概可以用63532次。

注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. DiA染色固定的细胞或组织样品时,通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

DiA(细胞膜绿色荧光探针) 货号:               D4059  规格:               50 mg D4059    
MSDS:

MSDS D4059 DiA (Green fluorescence probe for cell membrane)
常见问题解答:

细胞追踪有很多产品,该如何选择?
首先确定追踪细胞的时间,然后考虑染料结合机制。
1.钙黄绿素染料(C4041)标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果极佳,但也会被某些类型细胞迅速外排。
2.亲脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能标记细胞膜而不破坏其功能,并且能持续更长时间,但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外,它们还会在透化过程中丢失。
3.CellTracker染料(C4060)更有利于长期标记,其带有温和的氯甲基反应基团使之能够与细胞组分共价结合。
4.CFDA SE(C4070)也能共价地结合于细胞组分。
在所有列出的试剂中,细胞内保留与否取决于细胞分裂的速率和细胞的固有特性(主动外排,膜和蛋白质的周转率等)。其中共价结合试剂比非共价结合的试剂展现出更长的保留时间
使用本产品的文献:

参考文献
1.Localization and retention in vitro of fluorescently labeled aortic baroreceptor terminals on neurons from the nucleus tractus solitarius
应用方向:神经纤维示踪

2.Soluble factors from the olfactory bulb attract olfactory Schwann cells
应用方向:双色神经元示踪(with DiI)

3.Gradual loss of synaptic cartels precedes axon withdrawal at developing neuromuscular junctions
应用方向:固定组织染色(DiO无法标记的情况)

5(6)-CFDA, SE(5(6)-羧基荧光素二乙酸,琥珀酰亚胺酯) 货号: C4070 规格: 5 mg

5(6)-CFDA, SE(5(6)-羧基荧光素二乙酸,琥珀酰亚胺酯)

产品货号: C4070

产品规格: 5 mg

目录价(元):320

推荐仪器:荧光显微镜、流式细胞仪

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产品概述:

产品参数
外观:可溶于 DMSO 的白色或浅黄色固体
CAS 号:150347-59-4
Ex/Em:494/521 nm(pH=7)
分子式:C29H19NO11
分子量:
557.5
细胞标记机制:

5(6)-CFDA, SE(5(6)-羧基荧光素二乙酸,琥珀酰亚胺酯) 货号:               C4070  规格:               5 mg

储存条件
-20℃ 避光保存,有效期见外包装。

产品介绍
5(6)-CFDA, SE 是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞示踪染料,不仅可用于细胞增殖的体外实验,还可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程。
5(6)-CFDA, SE 是二乙酸荧光素(Fluorescein diacetate, FDA)的衍生物,具有细胞膜渗透性,本身不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后,被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester,CFSE),可发强烈的绿色荧光,不能穿透细胞膜,能完好的保留在胞内。CFSE 还可自发并不可逆地与细胞内的氨基结合从而偶联到细胞蛋白质上,同时过量且未被偶联的 5(6)-CFDA, SE通过被动扩散回到细胞外培养基内,被后续清洗步骤所清除。经 5(6)-CFDA, SE 标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数月,因此非常适用于细胞群落分析。
5(6)-CFDA, SE 标记细胞的荧光非常均一,优于以前使用的其他细胞示踪荧光探针如 PKH 26,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也很均一。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代细胞的一半,通过流式细胞仪(FL1 通道)根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2 的荧光强度),二次(1/4 的荧光强度),三次(1/8 的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。5(6)-CFDA, SE 可检测分裂次数多达八次甚至更多。经 5(6)-CFDA, SE 标记的细胞可用于体外和体内增殖研究 ,且具有不会使邻近细胞染色的功能 。5(6)-CFDA, SE 最常用于淋巴细胞的增殖检测,也可用于成纤维细胞,自然杀伤细胞,造血祖细胞等其他细胞的增殖检测。
5(6)-CFDA, SE 标记细胞呈绿色荧光,除了流式细胞仪检测细胞增殖外,还可用荧光酶标板定量活细胞数目,或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。

注意事项
1. 5(6)-CFDA, SE 与胺基反应,所以实验过程中不可使用含胺的缓冲液。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
说明书:

5(6)-CFDA, SE(5(6)-羧基荧光素二乙酸,琥珀酰亚胺酯) 货号:               C4070  规格:               5 mg C4070    
常见问题解答:

细胞追踪有很多产品,该如何选择?
首先确定追踪细胞的时间,然后考虑染料结合机制。
1.钙黄绿素染料(C4041)标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果极佳,但也会被某些类型细胞迅速外排。
2.亲脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能标记细胞膜而不破坏其功能,并且能持续更长时间,但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外,它们还会在透化过程中丢失。
3.CellTracker染料(C4060)更有利于长期标记,其带有温和的氯甲基反应基团使之能够与细胞组分共价结合。
4.CFDA SE(C4070)也能共价地结合于细胞组分。
在所有列出的试剂中,细胞内保留与否取决于细胞分裂的速率和细胞的固有特性(主动外排,膜和蛋白质的周转率等)。其中共价结合试剂比非共价结合的试剂展现出更长的保留时间

CFDA SE能否用于干细胞的增殖检测?
CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒可以用于各种常见细胞的增殖和示踪检测,包括干细胞、神经细胞等

称量粉末的时候需要避光吗?
建议避光的

该产品是无菌的吗?
是粉末,用DMSO配制母液,不需要做过滤除菌


使用本产品的文献:

参考文献
1.5,6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester-labeled apoptotic and necrotic as well as detergent-treated cells can be traced in composite cell samples.
应用方向:除追踪活细胞外,还可以用来追踪复合样本中的死亡细胞 

2.Vascularized organoid engineered by modular assembly enables blood perfusion
应用方向:标记HepG2细胞进行共培养

3.Decreased proliferative capability of CD4(+) cells of elderly people is associated with faster loss of activation-related antigens and accumulation of regulatory T cells.
应用方向:染色组织块上采集的静脉血中分离出的外周血单个核细胞(PBMC)

4.Glioma stem cells promote radioresistance by preferential activation of the DNA damage response.
应用方向:对原发性胶质母细胞瘤T3590进行标记

5.Deletion of a coordinate regulator of type 2 cytokine expression in mice.

应用方向:标记CD4+T细胞


6.Fluorescent labeling of nano-sized vesicles released by cells and subseqUEnt quantitative and qualitative analysis by high-resolution flow cytometry.
应用方向:使用CFSE进行标记的外泌体可以用于后续FACS、NTA和显微镜观察使用

7-AAD(7-氨基放线菌素D) 货号: A4075 规格: 1 mg

7-AAD(7-氨基放线菌素D)

产品货号: A4075

产品规格: 1 mg

目录价(元):1600

推荐仪器:流式细胞仪、荧光显微镜

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产品概述:

产品参数
产品外观:可溶于DMSO和水的红色固体
分子式:C62H87N13O16
分子量:1270.5
Ex/Em:546/647 nm
CAS号:7240-37-1
分子结构图:

7-AAD(7-氨基放线菌素D) 货号:               A4075  规格:               1 mg

储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。

产品介绍
7-AAD是一种非渗透性的核酸荧光染料。该染料不能透过活细胞的细胞膜,但可穿透膜损伤细胞如晚期凋亡细胞或者坏死细胞的细胞膜并与其内的DNA结合,可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞,广泛用于流式细胞仪。
7-AAD与DNA结合后可发出强烈的荧光,其荧光特性与PI相似,可被488 nm氩离子激光激发,但其发射光谱较PI窄,且发射波长更长,对其他检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是PI的最佳替代品,可与多种488激发光激发的荧光染料联合使用,如FITC,PE等。
以贴壁细胞(盖玻片)举例,每个样本100 μL染色工作液(10 μM),1 mg配置的工作液大概可以用于787个样本。

注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

7-AAD(7-氨基放线菌素D) 货号:               A4075  规格:               1 mg A4075    
MSDS:

MSDS A4075 7-AAD
常见问题解答:

7-AAD作用类似于PI,可否用7-AAD做细胞周期检测试剂盒?

从原理上来说,7-AAD也可以用来做细胞周期检测试剂盒,但一般不用,用的较广的周期检测试剂盒有PI、Hoechest、TOTO-3、TOPRO-3、Draq 5。

在检测活力时不建议在添加 7-AAD 或 PI 后洗涤?
染料与 DNA 平衡结合。 因此,在分析过程中必须保持外部染料浓度,不应将染料洗掉。

YF®488(5) Azide 货号: YA0039 规格: 0.5 mg

YF®488(5) Azide

产品货号: YA0039

产品规格: 0.5 mg

目录价(元):2400

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产品概述:

货号

名称

规格

外观颜色

Ex/Em

(nm)

Extinction

coefficient(ε)

MW

效能等同于

YA0039

YF®488(5) Azide

0.5 mg

橙色

490/513

76, 000

861.0

Alexa Fluor 488, DyLight 488, FITC, FAM, Cy2

YA0042

YF®555 Azide

0.5 mg

红色

550/561

155, 000

1163.5

Alexa Fluor 555, Cy3,

Tetramethylrhodamine

YA0037

YF®568 Azide

0.5 mg

红色

573/595

88, 000

878.0

Alexa Fluor 568, Lissamine rhodamine B, ROX

YA0038

YF®594 Azide

0.5 mg

紫红色

585/609

92, 000

906.1

Alexa FLuor 594, Texas Red Dye, Cy3, DyLight 594

YA0041

YF®647A Azide

0.5 mg

蓝色

648/664

240, 000

1102.5

Alexa Fluor 647


产品参数
溶解性:可溶于DMSO或水

储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。

产品介绍

YF® Dye Azide可通过铜(I)催化的点击反应与炔类发生加成反应。YF® Dye Azide可用于流式细胞仪、荧光显微镜等。

注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

YF®488(5) Azide 货号:               YA0039  规格:               0.5 mg YA0039    
MSDS:

MSDS YF® Dye Azide

YF®633-Phalloidin YF®633标记鬼笔环肽(远红) 货号: YP0053S/YP0053L 规格: 50T/300T

YF®633-Phalloidin YF®633标记鬼笔环肽(远红)

产品货号: YP0053S/YP0053L

产品规格: 50T/300T

目录价(元):589/2063

推荐仪器:荧光显微镜

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产品概述:

货号

名称

Abs/Em (nm)

规格

YP0059S

YF®488-Phalloidin

YF®488标记鬼笔环肽(绿色)

490/515

50T

YP0059L

300T

YP0060S

YF®555-Phalloidin

YF®555标记鬼笔环肽(橙红)

555/565

50T

YP0060L

300T

YP0052S

YF®594-Phalloidin

YF®594标记鬼笔环肽(红色)

590/617

50T

YP0052L

300T

YP0053S

YF®633-Phalloidin

YF®633标记鬼笔环肽(远红)

630/650

50T

YP0053L

300T

YP0055S

YF®680-Phalloidin

YF®680标记鬼笔环肽(远红)

681/698

50T

YP0055L

300T

YP0063S

Rhodamine-Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽(橙红)

546/575

50T

YP0063L

300T

储存条件
-20℃干燥、避光保存,有效期见外包装。若配制成水溶液,应小量分装保存。

产品介绍
鬼笔环肽是从致命的伞形毒蕈蘑菇中分离出来的一种毒素。它是特异性结合于F-肌动蛋白的双环肽。因此用荧光染料标记的鬼笔环肽可以非常方便的研究F-肌动蛋白的分布。鬼笔环肽内部,在半胱氨酸和色氨酸之间含有不常见的硫醚桥形成内环结构。在pH升高时,该硫醚被裂解,鬼笔环肽失去对肌动蛋白的亲和力。
YF®染料是我司开发的一系列新一代荧光染料,与其他荧光染料相比,在亮度,光稳定性和水溶性方面具有综合优势。荧光标记的鬼笔环肽可在纳摩尔水平染色F-肌动蛋白。在各种植物细胞或动物细胞中,标记的鬼笔环肽对大、小细丝具有相似的亲和力,平均每个肌动蛋白亚基结合一个鬼笔环肽分子。不同于抗体,鬼笔环肽与肌动蛋白的结合亲和力在不同物种间没有显着变化。非特异性染色可以忽略不计,染色和未染色区域之间的对比度非常大。鬼笔环肽将单体/聚合物的平衡转向聚合状态,将聚合临界浓度降低至30倍。鬼笔毒肽类(Phallotoxins)可通过抑制细胞松弛素的解聚,碘化钾和升高的温度,稳定F-肌动蛋白。因为鬼笔环肽缀合物很小,大约直径12-15 Å,分子量< 2000 Dal,多种肌动蛋白结合蛋白,包括肌球蛋白,原肌球蛋白和后肌钙蛋白依然可以和鬼笔环肽标记的肌动蛋白结合。更重要的是,鬼笔环肽标记的肌动蛋白丝保持功能,标记甘油肌纤维仍然收缩,标记的肌动蛋白丝仍然可以继续移动。而且荧光标记的鬼笔环肽也可用于对细胞中F-肌动蛋白进行定量研究。


注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 本产品为冻干粉形式,微量不易观察,使用前请瞬时离心,加适当溶剂溶解后使用,溶解后的溶液近乎透明色。


说明书:

YF®633-Phalloidin YF®633标记鬼笔环肽(远红) 货号:               YP0053S/YP0053L  规格:               50T/300T YP0053S/YP0053L    
MSDS:

MSDS YP0053 YF®633-Phalloidin
常见问题解答:

为什么我到的是空管

本产品为冻干粉形式,微量不易观察,使用前请瞬时离心,加适当溶剂溶解后使用

鬼笔环肽染色细胞骨架过程中,能使用甲醇固定细胞吗?

甲醇会破坏Actin蛋白,因此不能使用含有甲醇的固定液,并且使用不含甲醇的甲醛。

为什么用鬼笔环肽结合F-actin标记石蜡切片,没有看到信号?
当细胞和组织经由二甲苯或丙酮之类的溶剂处理时(例如组织切片脱石蜡期间),它通过阻止鬼笔环肽结合的方式来影响F-actin。可以使用通常不用有机溶剂洗涤的冷冻切片代替石蜡切片,或者可以使用抗肌动蛋白抗体。

鬼笔环肽染料能重复利用吗?
正常情况下染色液在使用后,可能会影响染色效果,最好不要重复使用;我们的鬼笔环肽按说明书添加,浓度较低,这是染料不能重复利用的原因。

鬼笔环肽染色F-Actin, 有的染上,有的没染上,并且染色信号较弱怎么办?
(1)可能是染料浓度低或孵育时间不足,建议增加染料浓度或培养时间。
(2)可能是在错误的波长下分析细胞,建议重新检查过滤器设置是否正确。

不进行透化步骤,鬼笔环肽直接染色固定后的细胞可以吗?
荧光标记的phalloidins,只能用于在固定透化后的组织切片、细胞培养和无细胞实验中染色F-actin。

染色后,没有荧光信号怎么办?
(1)检查储液、工作液配制是否有误。
(2)固定及透化步骤尤为重要,使用新鲜配置的4%多聚甲醛进行固定,使用新鲜配置的0.5% Triton X-100 进行透化。摸索最佳的固定及透化时间。
(3)摸索最佳染色工作液浓度及染色时间。

可以用于做流式细胞吗?
该产品主要是用于微丝的染色,一般用荧光显微镜观察结果,不推荐用流式检测。

可以用普通荧光显微镜观察吗?
普通的荧光显微镜也是可以检测的,激光共聚焦拍照效果会更好一些。

探针的浓度是多少?
请按照说明书的稀释比例进行使用,具体浓度信息未知。


使用本产品的文献:

Multifaceted Characterization of the Signatures and Efficacy of Mesenchymal Stem/Stromal Cells in Acquired Aplastic Anemia

  • Jiali Huo,
  • Leisheng Zhang,
  • Xiang Ren
  • Chengwen Li
  • Xingxin Li
  • Peiyuan Dong, 
  • Xuan Zheng
  • Jinbo Huang
  • Yingqi Shao
  • Meili Ge, 
  • Jing Zhang
  • Min Wang
  • Neng Nie
  • Peng Jin & 
  • Yizhou Zheng

Stem Cell Research & Therapy


参考文献:
1.4D Super-Resolution Microscopy with Conventional Fluorophores and Single Wavelength Excitation in Optically Thick Cells and TissUEs
应用方向:人体组织切片,心脏大鼠心肌细胞和密集生长的神经元培养物

2.Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
应用方向组织切片、动物细胞、植物细胞

3.A balance of Btk and SHIP activation regulates B-cell receptor cluster formation by controlling actin remodeling
应用方向哺乳动物细胞:小鼠脾B细胞

4.Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
应用方向组织切片

5.Formation of actin clusters in rat liver parenchymal cells on phalloidin poisoning as visualized by a fluorescent phallotoxin
应用方向组织切片

6.F-actin architecture in coleoptile epidermal cells
应用方向植物细胞

7.A Rac switch regulates random versus directionally persistent cell migration
应用方向哺乳动物细胞: 原代人类成纤维细胞

8.A role for actin, Cdc1p, and Myo2p in the inheritance of late Golgi elements in Saccharomyces cerevisiae.
应用方向酿酒酵母菌细胞

DiBAC4(3)膜电位荧光探针 货号: D4008 规格: 5 mg

DiBAC4(3)膜电位荧光探针

产品货号: D4008

产品规格: 5 mg

目录价(元):250

推荐仪器:荧光显微镜

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产品概述:

产品参数
外观:可溶于 DMF 或 DMSO 的橘色固体
Ex/Em (MeOH) = 493/516 nm
CAS 号:70363-83-6
分子式:C27H40N4O6
分子量:
516.6

分子结构图:

DiBAC4(3)膜电位荧光探针 货号:               D4008  规格:               5 mg

储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。

产品介绍
DiBAC4(3) 是一种慢响应膜电位探针,它进入到去极化的细胞,和细胞内的蛋白或膜结合,发出很强的荧光。细胞去极化导致染料内流,荧光增强;相反,细胞超极化则荧光减弱。

注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光, 以减缓荧光淬灭。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
说明书:

DiBAC4(3)膜电位荧光探针 货号:               D4008  规格:               5 mg D4008    
MSDS:

MSDS D4008 DiBAC4(3)
使用本产品的文献:

参考文献
1.Assessment of E. coli and Salmonella viability and starvation by confocal laser microscopy and flow cytometry using rhodamine 123, DiBAC4(3), propidium iodide, and CTC.
应用方向:测定大肠杆菌和沙门氏菌饥饿时的膜去极化

2.Usefulness and limitation of DiBAC4(3), a voltage-sensitive fluorescent dye, for the measurement of membrane potentials regulated by recombinant large conductance Ca2+-activated K+ channels in HEK293 cells.
应用方向:检测10微米Evans蓝(BK通道开放剂)引起的膜超极化

3.The calcium response to the excitotoxin kainate is amplified by subseqUEnt reduction of extracellular sodium.
应用方向:研究小脑颗粒细胞膜电位的变化

4.Cytochrome P-450 metabolites but not NO, PGI2, and H2O2 contribute to ACh-induced hyperpolarization of pressurized canine coronary microvessels.
应用方向:研究冠状微血管超极化

5.Effect of u.v. light irradiation, starvation and heat on Escherichia coli beta-D-galactosidase activity and other potential viability parameters.
应用方向:研究大肠杆菌细胞膜电位

6.Bending the primary cilium opens Ca2+-sensitive intermediate-conductance K+ channels in MDCK cells.
应用方向:测定MDCK细胞膜电位差的变化

YF®488(6)-2-dUTP(YF®488(6)-2标记dUTP) 货号: YD0045 规格: 25 nmole

YF®488(6)-2-dUTP(YF®488(6)-2标记dUTP)

产品货号: YD0045

产品规格: 25 nmole

目录价(元):3160

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产品概述:

产品规格:

货号

名称

外观颜色

分子量

Ex/Em (nm)

YD0045

YF®488(6)-2-dUTPYF®488(6)-2标记dUTP

橙色

1555.3

491/512

YD0046

YF®555-dUTPYF®555标记dUTP

红色

1652.6

550/561

YD0044

YF®594-3-dUTPYF®594-3标记dUTP

紫红色

1642.4

585/609

YD0043

YF®640-dUTPYF®640标记dUTP

蓝色

1867.8

641/658


储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。可以采用pH7.410 mM Tris溶解后,分装保存,避免反复冻融。


说明书:

YF®488(6)-2-dUTP(YF®488(6)-2标记dUTP) 货号:               YD0045  规格:               25 nmole YD0045    
MSDS:

MSDS YD0045 YF®488(6)-2-dUTP

Super-n-stain® Biotin Antibody Labeling Kits(Biotin抗体标记试剂盒) 货号: S601101S/S601101M/S601101L 规格: 5-20 μg/kit / 20-50 μg/kit / 50-100 μg/kit

Super-n-stain® Biotin Antibody Labeling Kits(Biotin抗体标记试剂盒)

产品货号: S601101S/S601101M/S601101L

产品规格: 5-20 μg/kit / 20-50 μg/kit / 50-100 μg/kit

目录价(元):950/1050/1150

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产品概述:

产品内容:

组分

S6011S (5-20 μg)

S6011M (20-50 μg)

S6011L (50-100 μg)

A: Dye vial

1 vial

1 vial

1 vial

B: Super-n-stain® reaction buffer, 10 ×

1 vial of 15 μL

1 vial of 15 μL

1 vial of 30 μL

C: Super-n-stain® antibody storage buffer

1 vial of 60 μL

1 vial of 150 μL

1 vial of 300 μL

D: Ultrafiltration vial (MWCO=10K)

1 each

1 each

1 each

 

染料信息 :

Super-n-stain® Antibody Labeling Kit

货号

Label Dye

Ex (nm)

Em (nm)

1 ×(5-20 μg)

1 ×(20-50 μg)

1 ×(50-100 μg)

Biotin

N/A

N/A

S601101S

S601101M

S601101L

FITC

494

518

S601102S

S601102M

S601102L

YF®350 SE

349

448

S601103S

S601103M

S601103L

YF®405S SE

399

421

S601104S

S601104M

S601104L

LS405 SE

407

448

S601105S

S601105M

S601105L

YF®488(6)-2 SE

491

512

S601106S

S601106M

S601106L

YF®532 SE

523

545

S601107S

S601107M

S601107L

YF®555 SE

550

561

S601121S

S601121M

S601121L

YF®568 SE

573

595

S601108S

S601108M

S601108L

YF®594 SE

585

609

S601109S

S601109M

S601109L

YF®640 SE

641

658

S601112S

S601112M

S601112L

YF®647A SE

648

664

S601113S

S601113M

S601113L

YF®660 SE

661

679

S601114S

S601114M

S601114L

YF®750 SE

747

770

S601120S

S601120M

S601120L

 

储存条件:

-20℃保存,有效期见外包装。

产品介绍:

Super-n-stain®   抗体标记试剂盒包含您需要的利用本公司 YF  染料或生物素(Biotin)迅速标记抗体的所有组分。标记过 程只需将抗体和染料简单混合于试剂盒内提供的反应缓冲溶液中,进行短时间的孵育即可。 Super-n-stain®   染料在标记结束 时不再反应, 因此无需进一步纯化步骤。标记后, 约 4-6 分子染料与 1 分子抗体共价结合。 Super-n-stain®是共价标记, 所以用它标记的抗体可以用于多色荧光染色,而不会发生抗体间的染料转移现象。Super-n-stain®  标记可以兼容 NaN3、低浓度的甘油、 Tris 和甘氨酸。试剂盒里提供的微型超滤离心管可以在标记前快速去除不兼容的小分子抗体稳定剂。

标准 Super-n-stain®   标记步骤可以用于多于 IgG (μg) 4 倍的 BSA 或明胶样品。根据您希望标记的 IgG 量来选择试剂盒大 小。优化标记步骤适用于稳定蛋白质过剩或腹水的 IgG 样品。在这种情况下,根据需要标记抗体样本的蛋白质总量(IgG + 稳定剂, 或腹水中总蛋白量) 来选择试剂盒大小。优化步骤也可用于标记 IgG 量低于最低范围的样品, 通过添加稳定剂蛋白 使总蛋白量达到试剂盒的标记范围。优化步骤不建议用于标记天然抗血清或杂交瘤细胞株培养上清, 因为这些样本的抗体含量相对于总蛋白非常低。当用荧光标记抗体直接进行免疫荧光时, 可能需要使用更高浓度的抗体来实现类似间接免疫荧光法检测(一抗加标记二抗)染色的强度。在我们的内部测试中发现,间接免疫荧光染色结果是直接免疫荧光染色信号的三倍左右。

标记二抗仍可以连接到使用 Super-n-stain®   试剂盒标记的一抗上, 因此如果多个来自同一物种的抗体用于多色免疫荧光 染色法,二抗无法区分同一物种来源的未标记的一抗和使用 Super-n-stain®   试剂盒标记的一抗。 Super-n-stain®标记抗体可以 用作传统间接免疫荧光法检测后的三级染色。UElandy  还提供生物素 Super-n-stain®   标记试剂盒、二次检测使用的 YF  染料标记的链霉亲和素或 YF 染料标记的单克隆生物素抗体。我们还提供酶标记和荧光蛋白标记的 Super-n-stain®试剂盒, 以及小配体标记试剂盒(请访问 www.uelandy.com)。更多信息,请参见常见问题。

注意事项:

1.  管子从冰箱拿出需先恢复至室温,再揭开管子封口膜打开产品,避免产品回潮,影响产品使用效果。

 Super-n-stain®   抗体标记试剂盒常见问题

问题

解答

实验过程中没有纯化步骤,我如何将未标记上的荧光染料除去?

该问题描述了我们研发的关键因素,我们独特的染料、缓冲液组分以及完善的标记策略已经完美地解决了这个问题,具体机制涉及专利保护,不便 透露。

Super-n-stain®   试剂盒可用于多色免疫标记 吗,不同抗体间是否会发生染料转移?

Super-n-stain®   试剂盒抗体与染料是共价结合方式,不存在染料扩散和转移 现象。详细信息请参照上面产品说明部分。

Super-n-stain®   试剂盒可用于标记抗体以外的蛋白吗?

该试剂盒是针对 IgG 抗体标记优化设计的,不推荐用于标记其它蛋白。Super-n-stain®  标记条件可能会导致 IgM 变性。

Super-n-stain®   试剂盒标记一抗和二抗的灵 敏性是否一样?

直接免疫荧光检测信号会弱于间接检测,详细信息请参照上面产品说明部 分。

用标记二抗的间接标记相比,直接标记复合物有哪些优势?

直接免疫染色避免了二抗孵育和清洗的步骤,容许来自同一物种的多个抗体同时使用进行多色检测,可以使用来自同一物种的抗体进行动物组织染 色,从而避免了二抗的交叉反应。

 

Super-n-stain®   试剂盒与 Invitrogen’s Zenon 抗体标记试剂盒相比,有哪些优势?

主要优势: 1. YF  染料与抗体共价结合避免了多重染色时染料转移和扩散现象; 2. Super-n-stain®   复合物在储液中可稳定保存几个月之久,而 Zenon标记物必须在 30min  内使用; 3. Super-n-stain®   复合物体积更小些,因为染料直接与抗体结合,而 Zenon  复合物与抗体片段配合使用; 4.  无需进 YF 染料与标记蛋白的比例优化,直接混合、染色即可; 5.  无需进行后染固定; 6.没有种属特异性

Super-n-stain®   试剂盒与 Innova BioscienceLightning-link 快速抗体标记试剂盒相比,有哪些优势?

Super-n-stain®   试剂盒使用荧光更亮、光稳定性更好的 YF 染料,试剂盒规 格更灵活,可提供至单个抗体标记反应。

什么是 YF 染料?

YF  染料是一种水溶性较好、用于标记蛋白和核酸的小分子有机染料。我 们可提供多达 20 种的此类 YF 染料。

 我应如何选择 Super-n-stain®   试剂盒?

每种 YF  染料,我们都提供三种不同抗体标记量的试剂盒,分别是: 5-20μg, 20-50 μg, 50- 100 μg。对于没有稳定剂的抗体标记,根据抗体规格,选 择其中一种即可,含有稳定剂的抗体标记,请参考产品描述中的表 1

若待标记抗体总量适用于两种 Super-n-stain®   试剂盒,我应如何选择?例如:标 50 μg 抗体,我应购买 50- 100 μg  抗体标记试剂盒还是 20-50 μg  的试剂盒?

 遇到这种情况,两种规格都可以得到较好的结果,使用较小规格的效果更 好。

如何选择染料与蛋白的比例获得较好的标记效果?

如果待标记的抗体量在试剂盒范围内,无需改变染料量或反应时间,因为 Super-n-stain®   试剂盒中染料和反应缓冲液可以确保较好的标记效果。

我可以拆分试剂盒组分,以便多次使用吗?

不行,因为 Super-n-stain®   试剂盒已经优化至一个标记单位,我们不建议 拆分试剂盒以标记多个抗体或多次使用。

 抗体浓度是否影响标记效率?

Super-n-stain®   试剂盒较好的标记抗体浓度为 0.5- 1 mg/mL,您可通过浓缩或稀释使待标记抗体达到上述浓度范围,小于或超过该浓度范围,会导致 标记效率过低或过多。

使用标记后的抗体进行免疫荧光染色未观 察到荧光信号

与供应商联系,确保抗体组分、浓度在容许范围内。

 

  使用标记后的抗体进行免疫荧光染色未观察到荧光信号怎么办?

与供应商联系,确保抗体组分、浓度在容许范围内。在直接标记前,应确定用于间接标记的一抗的敏感性和特异性。为了得到与间接标记相同的信号强度,直接标记时需要使用更高浓度的一抗,更多信息请参考产品应用部分。共价标记可能会影响某些抗体的反应活性。可以通过实验确定是否是这一因素的原因,即使用 Super-n-stain®   标记的一抗和荧光标记的二抗进行间接免疫染色,以确定 Super-n-stain®   标记后的一抗是否仍具有反应活性。如果有兼容 YF  染料的激发/发射波长的荧光读胶仪或扫描仪,可

以通过 SDS-PAGE  电泳确定抗体是否标记上染料,取 0.1-0.5 μg  标记抗体进行变性 SDS-PAGE  电泳,然后进行凝胶拍照,你应该可以观察到IgG  55 kDa  的重链和 25 kDa 的轻链对应的两条荧光条带。

 


说明书:

Super-n-stain® Biotin Antibody Labeling Kits(Biotin抗体标记试剂盒) 货号:               S601101S/S601101M/S601101L  规格:               5-20 μg/kit / 20-50 μg/kit / 50-100 μg/kit S601101S/S601101M/S601101L    
MSDS:

MSDS S601101 Super-n-stain® Biotin Antibody Labeling Kits
常见问题解答:

实验过程中没有纯化步骤,我如何将未标记上的荧光染料除去?
该问题描述了我们研发的关键因素,我们独特的染料、缓冲液组分以及完善的标记策略已经完美地解决了这个问题,具体机制涉及专利保护,不便透露。

Super-n-stain® 试剂盒可用于多色免疫标记吗,不同抗体间是否会发生染料转移?
Super-n-stain® 试剂盒抗体与染料是共价结合方式,不存在染料扩散和转移现象。详细信息请参照上面产品说明部分。

Super-n-stain® 试剂盒可用于标记抗体以外的蛋白吗?
该试剂盒是针对 IgG 抗体标记优化设计的,不推荐用于标记其它蛋白。Super-n-stain® 标记条件可能会导致 IgM 变性。

Super-n-stain® 试剂盒标记一抗和二抗的灵敏性是否一样?
直接免疫荧光检测信号会弱于间接检测,详细信息请参照上面产品说明部分。

用标记二抗的间接标记相比,直接标记复合物有哪些优势?
直接免疫染色避免了二抗孵育和清洗的步骤,容许来自同一物种的多个抗体同时使用进行多色检测,可以使用来自同一物种的抗体进行动物组织染色,从而避免了二抗的交叉反应。

Super-n-stain® 试剂盒与 Invitrogen’s Zenon 抗体标记试剂盒相比,有哪些优势?
主要优势:
1. YF 染料与抗体共价结合避免了多重染色时染料转移和扩散现象;
2. Super-n-stain® 复合物在储液中可稳定保存几个月之久,而 Zenon 标记物必须在 30min 内使用;
3. Super-n-stain® 复合物体积更小些,因为染料直接与抗体结合,而 Zenon 复合物与抗体片段配合使用;
4. 无需进行 YF 染料与标记蛋白的比例优化,直接混合、染色即可;
5. 无需进行后染固定;
6.没有种属特异性

Super-n-stain® 试剂盒与 Innova Bioscience Lightning-link 快速抗体标记试剂盒相比,有哪些优势?

Super-n-stain® 试剂盒使用荧光更亮、光稳定性更好的 YF 染料,试剂盒规格更灵活,可提供至单个抗体标记反应。


什么是 YF 染料?

YF 染料是一种水溶性较好、用于标记蛋白和核酸的小分子有机染料。我们可提供多达 20 种的此类 YF 染料。

我应如何选择 Super-n-stain® 试剂盒?

每种 YF 染料,我们都提供三种不同抗体标记量的试剂盒,分别是:5-20 μg, 20-50 μg, 50-100 μg。对于没有稳定剂的抗体标记,根据抗体规格,选择其中一种即可,含有稳定剂的抗体标记,请参考产品描述中的表 1。

若待标记抗体总量适用于两种 Super-n-stain® 试剂盒,我应如何选择?

例如:标记 50 μg 抗体,我应购买 50-100 μg 抗体标记试剂盒还是 20-50μg 的试剂盒?

遇到这种情况,两种规格都可以得到较好的结果,使用较小规格的效果更好。

如何选择染料与蛋白的比例获得较好的标记效果?

如果待标记的抗体量在试剂盒范围内,无需改变染料量或反应时间,因为 Super-n-stain® 试剂盒中染料和反应缓冲液可以确保较好的标记效果。

我可以拆分试剂盒组分,以便多次使用吗?
不行,因为 Super-n-stain® 试剂盒已经优化至一个标记单位,我们不建议拆分试剂盒以标记多个抗体或多次使用。

抗体浓度是否影响标记效率?
Super-n-stain® 试剂盒较好的标记抗体浓度为 0.5-1 mg/mL,您可通过浓缩或稀释使待标记抗体达到上述浓度范围,小于或超过该浓度范围,会导致标记效率过低或过多。

使用标记后的抗体进行免疫荧光染色未观察到荧光信号?
与供应商联系,确保抗体组分、浓度在容许范围内。

使用标记后的抗体进行免疫荧光染色未观察到荧光信号怎么办?

与供应商联系,确保抗体组分、浓度在容许范围内。在直接标记前,应确定用于间接标记的一抗的敏感性和特异性。为了得到与间接标记相同的信号强度,直接标记时需要使用更高浓度的一抗,更多信息请参考产品应用部分。共价标记可能会影响某些抗体的反应活性。可以通过实验确定是否是这一因素的原因,即使用 Super-n-stain® 标记的一抗和荧光标记的二抗进行间接免疫染色,以确定 Super-n-stain® 标记后的一抗是否仍具有反应活性。如果有兼容 YF 染料的激发/发射波长的荧光读胶仪或扫描仪,可以通过 SDS-PAGE 电泳确定抗体是否标记上染料,取 0.1-0.5 μg 标记抗体进行变性 SDS-PAGE电泳,然后进行凝胶拍照,你应该可以观察到 IgG 的 55 kDa 的重链和 25 kDa 的轻链对应的两条荧光条带。


使用本产品的文献:

参考文献
1.Paraoxonase 2 decreases renal reactive oxygen species production, lowers blood pressure, and mediates dopamine D2 receptor-induced inhibition of NADPH oxidase
应用方向:polyclonal rabbit anti-PON2 antibody/  polyclonal rabbit anti-D2R antibody 

2.The Q loops of the human multidrug resistance transporter ABCB1 are necessary to couple drug binding to the ATP catalytic cycle
应用方向:Primary antibody 4E3

3.Increased Metabolite Levels of Glycolysis and Pentose Phosphate Pathway in Rabbit Atherosclerotic Arteries and Hypoxic Macrophage
应用方向:anti-Ki-67 antibody/anti-macrophage antibody / anti-SMC antibody

4.Mucosal immunoglobulins at respiratory surfaces mark an ancient association that predates the emergence of tetrapods
应用方向:rabbit anti-trout IgT / mouse anti-trout IgM / rabbit anti-Ich

5.Data ofrationalprocessoptimization for the production of a full IgG and its Fab fragment from hybridoma cells
应用方向:IgG

6.Adenoviral L4 33K forms ring-like oligomers and stimulates ATPase activity of IVa2: implications in viral genome packaging
应用方向:polyclonal anti-IVa2 and anti-33K antibodies

7.Principal cell activity induces spine relocation of adult-born interneurons in the olfactory bulb
应用方向:Anti-synaptophysin antibody

8.Enhancing proteasome-inhibitory activity and specificity of bortezomib by CD38 targeted nanoparticles in multiple myeloma
应用方向:anti-CD38 chitosan NPs

WonderBlue® Broad Range 双链DNA定量试剂盒 货号: W2010S/W2010L 规格: 200T/1000T

WonderBlue® Broad Range 双链DNA定量试剂盒

产品货号: W2010S/W2010L

产品规格: 200T/1000T

目录价(元):442/1547

推荐仪器:荧光酶标仪

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产品概述:

产品内容

组分 

W2010S200T

W2010L1000T

A. WonderBlue® Broad   Range Buffer

50 mL

250 mL

B. WonderBlue® Broad   Range Dye,100×in DMSO

0.5 mL

2 × 1.25 mL

C. WonderBlue® Broad   Range Enhancer, 100× in water

0.5 mL

2 × 1.25 mL

D. dsDNA Standards in 10 mM Tris pH 7.5,1 mM   EDTA,2 mM sodium azide.0,2,6.25,12.5,25,50,100,150 and 200 ng/μL dsDNA from   calf thymus

每组0.1 mL9组)

每组0.5mL9组)

 

储存条件

4℃避光保存,有效期见外包装

 

产品参数

Ex/Em350/460 nm(结合dsDNA

                                               WonderBlue® Broad Range 双链DNA定量试剂盒 货号:               W2010S/W2010L  规格:               200T/1000T

1. dsDNA过饱和的条件下,WonderBlue®的激发与发射光谱图。

产品介绍

WonderBlue® Broad Range双链DNA定量试剂盒可以在200 µL体系内定量2-2000 ngdsDNA。不同于常规的基于吸光度的测量,这款试剂

盒可以区分dsDNAssDNARNA,有选择性地检测dsDNA(见图2)。与传统DNA定量方法相比,该产品具有检测范围广、高灵敏度、

高特异性等优点。试剂盒主要包含WonderBlue® Broad Range dsDNA Quantitation Buffer, Dye solution, Enhancer solution以及pre-diluted 

dsDNA Standards四个组分。此外,试剂盒还可以将其他污染物的影响降低至最低,可以耐受常规污染物例如蛋白质、盐、有机溶剂和洗

涤剂等


说明书:

WonderBlue® Broad Range 双链DNA定量试剂盒 货号:               W2010S/W2010L  规格:               200T/1000T W2010S/W2010L    
常见问题解答:

该试剂盒对基因组DNA的质量有要求吗?

通过苯酚氯仿提取纯化的基因组 DNA 足够干净,可用于该试剂盒。

DNA标准品是如何制备的? 可以单独购买吗?
试剂盒中使用的 DNA 标准品是小牛胸腺 DNA,它具有双链结构、高度聚合、碱基分配均匀(AT 含量58%,GC 含量42%),是经过测试的,且仅在该类试剂盒中提供。

3×GelstainRed Prestain上样缓冲液升级款 货号: S2025S/S2025M/S2025L 规格: 0.1 mL/1 mL/10 mL

3×GelstainRed Prestain上样缓冲液升级款

产品货号: S2025S/S2025M/S2025L

产品规格: 0.1 mL/1 mL/10 mL

目录价(元):59/236/1621

推荐仪器:紫外凝胶成像仪(主推)、蓝光切胶仪

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产品概述:

储存条件

4℃避光保存,有效期见外包装。

 

产品介绍

GelstainRed是一款非常灵敏、稳定,且安全无毒的新型核酸染料,它可以完全替代高诱变性的EB3× GelstainRed Prestain上样缓冲液升级款是一款包含示踪染料以及GelstainRed的凝胶Loading Buffer。这款预染缓冲液包含两种蓝色电泳示踪染料,在1%的琼脂糖凝胶中,分别指示1.5 Kb200 bp的电泳条带。该产品可以直接与DNA样品混合后上样,进行凝胶电泳实验,无需提前在配制琼脂糖凝胶中加入核酸染料,因此更加方便快捷。

GelstainRedEB具有几乎相同的光谱,因此GelstainRed可以在不改变现有成像系统的条件下代替EB。此外,GelstainRed还可兼容基因测序和克隆等下游一系列操作。使用商业化的DNA凝胶提取试剂盒、或者采用酚/氯仿抽提法、乙醇沉淀法等可以有效去除与DNA结合的GelstainRed


注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. TAETBE导电性能存在差异,如需缩短电泳时间,可选用TAE电泳缓冲液。

3. 电泳时电压不宜过高,一般为120 V左右,但具体条件视不同实验室而定。

4. 当上样浓度较大时,该产品也可以达到较理想的效果。


说明书:

3×GelstainRed Prestain上样缓冲液升级款 货号:               S2025S/S2025M/S2025L  规格:               0.1 mL/1 mL/10 mL S2025S/S2025M/S2025L    
MSDS:

MSDS S2025 3× GelstainRed Prestain Loading Buffer
常见问题解答:

条带模糊弯曲?

严格将样品与染料按照说明书中的比例预混,禁止染料与DNA随机预混上样。

条带暗淡?
1.核酸浓度过低,增加上样量。
2.核酸降解,使用不含核酸酶的试剂和耗材制备样本。


使用本产品的文献:

1.Genome-wide CRISPR-Cas9 screening in Bombyx mori reveals the toxicological mechanisms of environmental pollutants, fluoride and cadmium
Yue Liu,Jiasong Chang,Chengfei Yang,Tong Zhang,Xiaoxu Chen,Run Shi,Yan Liang,Qingyou Xia,Sanyuan Ma
Journal of Hazardous Materials Volume 410, 15 May 2021, 124666

总NO检测试剂盒(Total Nitric Oxide Assay Kit) 货号: T6027S/T6027L 规格: 50T/200T

总NO检测试剂盒(Total Nitric Oxide Assay Kit)

产品货号: T6027S/T6027L

产品规格: 50T/200T

目录价(元):499/1688

推荐仪器:酶标仪

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产品概述:

产品内容

组分

T6027S50T

T6027L200T

  A. 样品稀释液

4 mL

16 mL

  B. NADPH

0.5 mg

2 mg

  C. FAD

0.5 mL

2×1 mL

  D. Nitrate Reductase

250 μL

1 mL

  E. LDH Buffer

0.5 mL

2×1 mL

  F. LDH

0.5 mL

2×1 mL

  G. 1 M NaNO2

250 μL

1 mL

  H. Griess Reagent I

2 × 1.25 mL

10 mL

  I. Griess Reagent II

2 × 1.25 mL

10 mL


储存条件
-20℃保存,有效期见外包装。NADPH,Nitrate Reductase,NaNO2,Griess Reagent I 和 Griess Reagent II 需避光保存。NADPH 配制成溶液后须少量分装,并放于-70℃保存。

产品介绍
NO 作为重要的气体信号分子,广泛存在于生物体内和各个组织中,并且参与许多生物效应和生理病理过程,NO 带有自由基,这使它的化学性质非常活泼,在体内迅速氧化生成亚硝酸盐和硝酸盐混合物。本试剂盒基于 Griess 反应的原理,采用优化的反应条件,通过硝酸还原酶还原硝酸盐为亚硝酸盐,从而达到检测总 NO 含量的目的。
本试剂盒可以检测的样品有细胞裂解液、组织裂解液、细胞或组织的培养液、血清、血浆或尿液等中的一氧化氮含量。

注意事项
1. 如果 Griess Reagent I 取出时含有沉淀,可将其置于 37℃ 水浴锅中,水浴直至沉淀溶解。
2. 对于含有较高浓度硝酸盐的培养液,在检测一氧化氮前必需先换成其他适当培养液例如 DMEM、MEM、F12 等,或换成 HBSS 或 PBS 等。因为较高浓度的硝酸盐会对本试剂盒产生干扰。
说明书:

总NO检测试剂盒(Total Nitric Oxide Assay Kit) 货号:               T6027S/T6027L  规格:               50T/200T T6027S/T6027L    

YF®488-Annexin V/RedNucleus Ⅱ 细胞凋亡试剂盒 货号: Y6102S/Y6102M/Y6102L 规格: 10T/50T/100T

YF®488-Annexin V/RedNucleus Ⅱ 细胞凋亡试剂盒

产品货号: Y6102S/Y6102M/Y6102L

产品规格: 10T/50T/100T

目录价(元):317/1194/1769

推荐仪器:流式细胞仪(主推)、荧光显微镜

大包装询价


产品概述:

产品内容:

组分

Y6102S (10T)

Y6102M50T

Y6102L (100T)

A. 1× Annexin V 结合缓冲液

10 mL

50 mL

50 mL×2

B. YF®488-Annexin V

50 μL

250 μL

500 μL

C. RedNucleus II

100 μL

500 μL

1 mL

 

储存条件

4℃避光冷藏,请勿冻存。有效期见外包装

 

光谱特性

YF®488-Annexin VEx/Em=490/515 nm

RedNucleus IIEx/Em=635/695 nm

 

产品介绍

Annexin V(膜联蛋白-V)是一种分子量为 35-36 KD Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,可与磷脂酰丝氨酸(PS)选择性结合。磷脂酰丝氨酸(PS)主要分布在细胞膜内侧,即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期,不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面,暴露在细胞外环境中。此时,使用绿色荧光探针 YF®488 Annexin V,  YF®488-Annexin V,与外翻的磷脂酰丝氨酸(PS)结合,就可用流式细胞仪直接检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。正常细胞不会被 YF®488-Annexin V所染色,发生凋亡或坏死的细胞会被 YF®488-Annexin V 所染色。YF®488-Annexin V可以与部分非渗透性的细胞核染料(7-AAD/PI)等联合使用,区分处于不同凋亡时期的细胞。

本试剂盒中提供的 RedNucleus II 是一种远红光染料,属于蒽醌类化合物,不能透过活细胞和早期凋亡细胞完整的细胞膜,是非渗透性的,但是可以快速染色死亡和透化细胞中的细胞核/dsDNARedNucleus II 是一种理想的碘化丙啶(PI)和 7-AAD 的替代物。YF®488  RedNucleus II 之间光谱无交叉。与 YF®488-Annexin V 联用,对于无自发荧光、自带 RFP 或阿霉素诱导凋亡的细胞,都无需补偿调节。


注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. 为降低细胞凋亡进程,孵育过程可在冰上操作,但孵育时间至少延长至30 min

3. 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后 1 h之内进行分析。

4. 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,RedNucleus II 摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与 YF®488-Annexin V的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用 EDTAEDTA 会影响 Annexin V  PS 的结合。

5. 贴壁细胞用胰蛋白酶消化后,建议在最佳培养条件和培养基中恢复约30 min后染色,避免假阳性。

6. 为了避免洗涤细胞时损失细胞,在吸液时可以用大的 Tip 头套上小的 Tip 头吸液。

7. 染料的最佳使用浓度由具体实验要求确定。

8. 荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

9. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

YF®488-Annexin V/RedNucleus Ⅱ 细胞凋亡试剂盒 货号:               Y6102S/Y6102M/Y6102L  规格:               10T/50T/100T Y6102S/Y6102M/Y6102L    
MSDS:

MSDS Y6102 YF®488-Annexin V and RedNucleus Ⅱ Apoptosis Kit
常见问题解答:

为何染色结果显示细胞凋亡率过高?

1. 凋亡时间处理过长,使细胞全部死亡。建议重新摸索细胞凋亡条件,使细胞处于不同的凋亡状态。
2. 对于贴壁细胞,胰蛋白酶消化时间过长或机械刮擦细胞会暂时破坏质膜,使Annexin V能够与细胞膜胞内面上的磷脂酰丝氨酸结合,导致假阳性染色。建议在胰蛋白酶消化或机械刮擦细胞后,让细胞在最佳细胞培养条件和培养基中培养约30分钟,以恢复其膜完整性。

实验结果使用什么仪器观察?
实验结果可以通过流式细胞仪和荧光显微镜进行观察,但更推荐使用流式细胞仪。因为正常的细胞和凋亡的细胞膜上都有磷脂酰丝氨酸(PS),只是凋亡细胞膜外更多,可以结合更多的Annexin V,流式细胞仪更灵敏,可以区分出微小差异,将正常细胞与凋亡细胞分成不同的两群,但如果用荧光显微镜,可能观察不到这一差别,尤其是贴壁细胞。若要在成像测定中检测细胞凋亡,推荐使用SuperView™ 488 Caspase-3 Assay Kit for Live Cells。

流式细胞仪检测细胞凋亡,结果图中的各个象限代表什么状态的细胞?
左上角:Annexin V-/PI+,机械损伤细胞;右上角: AnnexinV+/PI+,晚期凋亡细胞或坏死;右下角:AnnexinV+/PI-,早期凋亡细胞;左下角:AnnexinV-/PI-,正常细胞。

这款试剂盒可同时检测出凋亡率和细胞周期分布吗?
不可以。检测细胞凋亡时PI结合的是核酸,包括DNA和RNA。而PI用于检测细胞周期时需要只结合DNA,由于RNA的干扰,用细胞凋亡检测试剂盒测出来的细胞周期不准。同时,凋亡检测与周期检测时PI的工作浓度以及样本处理都不一样。 如果需要进行细胞周期检测,推荐Cell Cycle and Apoptosis Kit(C6031)

各象限代表的细胞状态问题?
Q1:(AnnexinV-染料)-/PI+,此区域的细胞为坏死细胞。也可能有少数的晚期凋亡细胞在其中,甚至机械损伤的细胞也包含其中。Annexin V-/PI+越多,实验结果越不可信,建议实验中尽量控制这一象限细胞比例。
Q2: (AnnexinV+染料)+/PI+,此区域的细胞为晚期凋亡细胞或坏死。
Q3:(AnnexinV-染料)+/PI-,此区域的细胞为早期凋亡细胞。
Q4:(AnnexinV-染料)-/PI-,此区域的细胞为活细胞。

YF®488-Annexin V/RedNucleus Ⅱ 细胞凋亡试剂盒 货号:               Y6102S/Y6102M/Y6102L  规格:               10T/50T/100T


假阳性问题?

1. 消化液中含有EDTA或消化时间过长引起的假阳性。Annexin V和PS的结合需要Ca2+,而EDTA是Ca2+螯合剂,使用含有EDTA的胰酶会造成假阴性。其次消化时间不宜过长,吹打细胞要轻柔,因为胰酶的过度消化和机械损伤都会引起细胞膜的损伤,造成假阳性。细胞消化下来后,建议在培养箱中在孵育30min,使细胞膜恢复完整性,避免假阳性,或者将细胞报讯在含2% BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
2. 如果样品来源于血液,必须去除血液中的血小板,因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,干扰实验结果。建议:可以含有EDTA的缓冲液200g离心去除血小板, 最后细胞多洗几遍,减小EDTA螯合钙离子产生的影响。
3. 神经细胞膜容易破坏外翻,导致假阳性,所以Annexin V/PI 双染法流式检测细胞凋亡不适用于神经细胞。
4. 诱导时间过长。一般情况下诱导几个小时就可以出现早期凋亡,因此通常不需要处理大于48小时以上,诱导时间过长会使营养物质耗尽,导致细胞状态差,假阳性结果偏高。

荧光染料选择的问题?
1. 实验样本是否带荧光,因为感染病毒或质粒转染的细胞往往带GFP荧光,GFP与YF488/FITC通道重叠,不能选择YF488/FITC标记的Annexin V,此时如果只有488 nm一根激光管可以用PE标记Annexin V,用7-AAD代替PI,若有633 nm激光管,可以改用YF647 Annexin V代替YF488。
2. 如果流式细胞仪带有488 nm和633 nm两个或以上激光管,首先考虑用APC或YF647标记 Annexin V,因为它和PI通道几乎不用考虑光重叠问题,可以减少调节补偿的烦恼,如果只有488 nm激光管则可选择YF488/FITC标记的Annexin V。
3. 处理因素是否带有荧光,本实验室就碰到过一个促凋亡药物Doxorubicin本身发红色荧光,对PI通道的检测造成严重干扰,而且浓度越大干扰越明显。这时建议选用A6079或Y6102 。

圈门问题?
1.要特别注意在FSC/SSC圈门时,所选细胞范围会对结果造成较大影响,所以在分析数据时,要把所有细胞都圈进FSC/SSC的门内,这样实验结果才会更可信。如图,使细胞群大概位于对角线上,并且细胞群较集中,群内细胞比例要在80%以上,如果细胞全部圈入,细胞比例才50%或者更低,说明细胞被压在了坐标轴上,这时要重新调节FSC和SSC。
2.贴壁细胞做Annexin V凋亡检测,通常分群不太规则,这时我们可以根据不加药细胞来画不规则的十字门。如上面图形的设门方式:
YF®488-Annexin V/RedNucleus Ⅱ 细胞凋亡试剂盒 货号:               Y6102S/Y6102M/Y6102L  规格:               10T/50T/100TYF®488-Annexin V/RedNucleus Ⅱ 细胞凋亡试剂盒 货号:               Y6102S/Y6102M/Y6102L  规格:               10T/50T/100T

免疫染色与凋亡染色顺序问题?

Annexin V凋亡染色可以和抗体一起对细胞进行染色吗?
可以,但建议Annexin V和其它抗体分开染色。例如Annexin V、PI和CD3、CD8同时标记淋巴细胞,可以先在PBS中标记CD3/CD8后洗去,再在Binding buffer(含钙离子)中标记Annexin V。

这款试剂盒可同时检测出凋亡率和细胞周期分布吗?
不可以。检测细胞凋亡时PI结合的是核酸,包括DNA和RNA。而PI用于检测细胞周期时需要只结合DNA,由于RNA的干扰,用细胞凋亡检测试剂盒测出来的细胞周期不准。同时,凋亡检测与周期检测时PI的工作浓度以及样本处理都不一样。 若果需要进行细胞周期检测,推荐Cell Cycle and Apoptosis Kit(C6031)

固定、冷冻、切片或解离的组织,还可以做流式细胞分析吗?
不建议做流式细胞分析。因为流式细胞分析要求细胞分散、单个,活性好,这些状态下的样本外膜上的PS及膜的完整性都受到了影响,因此无法依赖膜的完整性区分健康细胞和凋亡细胞。组织在冻存、复温的过程中会有大量的细胞死亡,同时经过这一过程的组织在分离成单个细胞的时候会形成许多细胞碎片,不宜上流式检测,所以用于流式检测的标本最好是新鲜标本,即取材后立即检测,效果最好。 液氮保存的组织块,可以将组织标本进行切片,然后做原位染色,观察组织细胞的凋亡。

Annexin V可以用在植物和细菌中吗?
Annexin V也可以用在植物和细菌中检测凋亡,具体实验步骤可参考相关文献。

NerveRedTM C2神经元荧光探针 货号: N4073 规格: 5 × 1 mg

NerveRedTM C2神经元荧光探针

产品货号: N4073

产品规格: 5 × 1 mg

目录价(元):3200

推荐仪器:荧光显微镜

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产品概述:

产品参数
外观:可溶于水的紫色固体
Ex/Em:543/- nm (emission in MeOH is too weak to measure)
Ex/Em:510/750 nm (in membranes)
分子式:C30H45Br2N3
分子量:607.5
NerveRedTM C2神经元荧光探针 货号:               N4073  规格:               5 × 1 mg

储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。

产品介绍
神经末梢探针是一系列阳离子型苯乙烯基荧光染料,用于跟踪神经肌肉连接或突触的突触活动。这类染料通常具有亲脂性尾部(两个碳链)和带阳离子的高亲水性头部。NerveRedTM 系列探针是具有三个双键的染料。
阳离子苯乙烯基染料是通过活性依赖性染色突触小泡来发挥功能。染料与细胞或组织共孵育时,染料的水相部分没有荧光,而染料的亲脂性尾部插入细胞膜并呈现强荧光。神经刺激后,在进行胞吞作用时,染料被包裹在囊泡内,因此,洗去细胞表面附着的染料后,荧光信号强弱表示新形成的囊泡的数量的多少。反之,在胞吐作用时,染料与神经递质一起从囊泡释放,导致荧光信号减少。因此,荧光强度的变化反映了胞吞/胞吐或突触活动的情况。内吞过程中荧光增加的速率——“结合速率”和胞吐过程中荧光减少的速率 ——“解离速率”因染料种类而异。通常,具有较长亲脂性尾部和更多双键的染料对膜具有较高的亲和力,因此具有较高的结合速率和较低的解离速率。
本产品等同于 FM4-64,NerveRedTM C2 染料不能用于固定细胞染色,固定细胞的染色可选择 NM 系列染料。
说明书:

NerveRedTM C2神经元荧光探针 货号:               N4073  规格:               5 × 1 mg N4073    
MSDS:

MSDS N4073 NerveRedTM C2

生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG 货号: B6100S/B6100L 规格: 50 slides/200 slides

生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

产品货号: B6100S/B6100L

产品规格: 50 slides/200 slides

目录价(元):1490/4200

推荐仪器:荧光显微镜

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产品概述:

产品货号:

货号

产品名称

规格

Y6081S

YF®350酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

50 slides

Y6081L

200 slides

Y6082S

YF®350酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

50 slides

Y6082L

200 slides

Y6083S

YF®350酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素

50 slides

Y6083L

200 slides

Y6084S

YF®488酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

50 slides

Y6084L

200 slides

Y6085S

YF®488酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

50 slides

Y6085L

200 slides

Y6086S

YF®488酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素

50 slides

Y6086L

200 slides

Y6087S

YF®555酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

50 slides

Y6087L

200 slides

Y6088S

YF®555酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

50 slides

Y6088L

200 slides

Y6089S

YF®555酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素

50 slides

Y6089L

200 slides

Y6090S

YF®594 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

50 slides

Y6090L

200 slides

Y6091S

YF®594 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

50 slides

Y6091L

200 slides

Y6092S

YF®594 酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素

50 slides

Y6092L

200 slides

Y6093S

YF®640 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

50 slides

Y6093L

200 slides

Y6094S

YF®640 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

50 slides

Y6094L

200 slides

Y6095S

YF®640 酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素

50 slides

Y6095L

200 slides

Y6096S

YF®680 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

50 slides

Y6096L

200 slides

Y6097S

YF®680 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

50 slides

Y6097L

200 slides

Y6098S

YF®680 酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素

50 slides

Y6098L

200 slides

B6099S

生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

50 slides

B6099L

200 slides

B6100S

生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

50 slides

B6100L

200 slides

B6101S

生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素

50 slides

B6101L

200 slides

产品内容:

表1: 组分名称、编号及体积

组分编号

组分名称

组分体积

50 slides

200 slides

见表2

Tyramide Stock Solution, 200×

25 µL

100 µL

见表2

HRP-conjugated

25 µL

100 µL

60011

BSA

0.5 g

2 g

60012

1× Tyramide Amplification Buffer

5 mL

20 mL

表2: 试剂盒组分编号

标记染料

Ex/Em

HRP-conjugated

YF®/Biotin Tyramide

Goat anti-mouse IgG

Goat anti-rabbit IgG

Streptavidin

YF®350

347/448

60008

60009

60010

60001

YF®488

490/515

60008

60009

60010

60002

YF®555

555/565

60008

60009

60010

60003

YF®594

590/617

60008

60009

60010

60004

YF®640

642/662

60008

60009

60010

60005

YF®680

681/698

60008

60009

60010

60006

Biotin(生物素)

~

60008

60009

60010

60007


储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。


产品介绍

酪胺信号放大技术(Tyramide Signal Amplification)又称催化信号放大技术(Catalyzed Signal Amplification),是一类利用HRP对靶抗原进行高密度原位标记的酶学检测方法,其不但可以用于IF/IHC的信号放大,亦可用于Elisa、ISH等检测。
酪胺信号放大技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪胺的信号放大技术能够提供极强的灵敏度、检测极微量的目的抗原。酪胺信号放大技术极大的降低抗体的用量,节约抗体。酪胺信号放大试剂盒可与传统染色方法结合使用以多色成像,也可以顺序进行两个或更多个酪胺反应以标记一个样品上的不同靶标。


注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 1×Tyramide Amplification Buffer首次使用后,建议小量分装,-20℃保存,避免反复冻融。3. 与荧光二抗相比,Tyramide试剂盒显示出更高的灵敏度和更强的信号,因此,实验时一抗的使用浓度较低,建议梯度设置一抗浓度以找到最佳浓度。
4. 建议设置未孵育一抗的阴性对照,确保阴性对照在孵育和洗涤过程中没有被阳性样品中的试剂交叉污染。对于组织样品,建议对未染色的对照(不添加抗体或酪酰胺)进行成像,确定组织是否有自发荧光,排除对背景的影响。
5. 建议使用5 μg/mL的HRP结合物,降低浓度可能会影响信号强度和灵敏度。
6. 建议1:200稀释YF®/Biotin-Tyramide。较高的浓度可能会导致信号过强或背景高,建议从1:100到1:1000梯度稀释。
7. 可依次使用多个YF®/Biotin-Tyramide来标记同一样品的不同靶标,每次酪酰胺反应后需进行HRP淬灭或抗体剥离。
8. 多色标记时,依据抗原密度不同选择不同荧光素(低密度抗原选择强染料;高密度抗原选择较弱染料)。标记顺序对最终标记效果有一定影响,需自行摸索。


说明书:

生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG 货号:               B6100S/B6100L  规格:               50 slides/200 slides B6100S/B6100L    
MSDS:

MSDS Y6081, Y6082, Y6083, Y6084, Y6085, Y6086, Y6087, Y6088, Y6089, Y6090, Y6091, Y6092, Y6093, Y6094, Y6095, B6099, B6100, B6101 TSA Kit
常见问题解答:

什么是TSA技术?

TSA技术,即酪酰胺信号放大技术(Tyramide signal amplification, TSA)是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。

TSA试剂盒有哪些组分?
试剂盒固定组分BSA、1×Tyramide Amplification Buffer,可变组分Tyramide Stock Solution, 200×、HRP-conjugated secondary antibody。Tyramide Stock Solution, 200×可根据需求选择不同波长的YF/Biotin染料。HRP-conjugated secondary antibody可根据一抗在Goat anti-mouse IgG、Goat anti-rabbit IgG、Streptavidin中进行三选一。

TSA试剂盒适用于哪些样本?
TSA试剂盒适用于细胞、石蜡切片、冰冻切片样本。

石蜡切片样本进行多色标记的步骤?
每一轮标记后执行微波处理(抗原修复步骤)以去除抗体,再接下一轮的标记,因此可选择同种属来源的一抗,二抗具有通用性。

细胞样本可以用TSA技术进行多色标记吗?
可以。细胞样本多色标记步骤有别于石蜡切片,资料显示细胞样本多个靶标的标记需选择不同种属来源的一抗,对应不同种属来源的二抗。

生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG 货号: B6099S/B6099L 规格: 50 slides/200 slides

生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

产品货号: B6099S/B6099L

产品规格: 50 slides/200 slides

目录价(元):1490/4200

推荐仪器:荧光显微镜

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产品概述:

产品货号:

货号

产品名称

规格

Y6081S

YF®350酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

50 slides

Y6081L

200 slides

Y6082S

YF®350酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

50 slides

Y6082L

200 slides

Y6083S

YF®350酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素

50 slides

Y6083L

200 slides

Y6084S

YF®488酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

50 slides

Y6084L

200 slides

Y6085S

YF®488酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

50 slides

Y6085L

200 slides

Y6086S

YF®488酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素

50 slides

Y6086L

200 slides

Y6087S

YF®555酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

50 slides

Y6087L

200 slides

Y6088S

YF®555酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

50 slides

Y6088L

200 slides

Y6089S

YF®555酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素

50 slides

Y6089L

200 slides

Y6090S

YF®594 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

50 slides

Y6090L

200 slides

Y6091S

YF®594 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

50 slides

Y6091L

200 slides

Y6092S

YF®594 酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素

50 slides

Y6092L

200 slides

Y6093S

YF®640 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

50 slides

Y6093L

200 slides

Y6094S

YF®640 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

50 slides

Y6094L

200 slides

Y6095S

YF®640 酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素

50 slides

Y6095L

200 slides

Y6096S

YF®680 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

50 slides

Y6096L

200 slides

Y6097S

YF®680 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

50 slides

Y6097L

200 slides

Y6098S

YF®680 酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素

50 slides

Y6098L

200 slides

B6099S

生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG

50 slides

B6099L

200 slides

B6100S

生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG

50 slides

B6100L

200 slides

B6101S

生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素

50 slides

B6101L

200 slides

产品内容:

表1: 组分名称、编号及体积

组分编号

组分名称

组分体积

50 slides

200 slides

见表2

Tyramide Stock Solution, 200×

25 µL

100 µL

见表2

HRP-conjugated

25 µL

100 µL

60011

BSA

0.5 g

2 g

60012

1× Tyramide Amplification Buffer

5 mL

20 mL

表2: 试剂盒组分编号

标记染料

Ex/Em

HRP-conjugated

YF®/Biotin Tyramide

Goat anti-mouse IgG

Goat anti-rabbit IgG

Streptavidin

YF®350

347/448

60008

60009

60010

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Biotin(生物素)

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储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。


产品介绍

酪胺信号放大技术(Tyramide Signal Amplification)又称催化信号放大技术(Catalyzed Signal Amplification),是一类利用HRP对靶抗原进行高密度原位标记的酶学检测方法,其不但可以用于IF/IHC的信号放大,亦可用于Elisa、ISH等检测。
酪胺信号放大技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪胺的信号放大技术能够提供极强的灵敏度、检测极微量的目的抗原。酪胺信号放大技术极大的降低抗体的用量,节约抗体。酪胺信号放大试剂盒可与传统染色方法结合使用以多色成像,也可以顺序进行两个或更多个酪胺反应以标记一个样品上的不同靶标。


注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 1×Tyramide Amplification Buffer首次使用后,建议小量分装,-20℃保存,避免反复冻融。3. 与荧光二抗相比,Tyramide试剂盒显示出更高的灵敏度和更强的信号,因此,实验时一抗的使用浓度较低,建议梯度设置一抗浓度以找到最佳浓度。
4. 建议设置未孵育一抗的阴性对照,确保阴性对照在孵育和洗涤过程中没有被阳性样品中的试剂交叉污染。对于组织样品,建议对未染色的对照(不添加抗体或酪酰胺)进行成像,确定组织是否有自发荧光,排除对背景的影响。
5. 建议使用5 μg/mL的HRP结合物,降低浓度可能会影响信号强度和灵敏度。
6. 建议1:200稀释YF®/Biotin-Tyramide。较高的浓度可能会导致信号过强或背景高,建议从1:100到1:1000梯度稀释。
7. 可依次使用多个YF®/Biotin-Tyramide来标记同一样品的不同靶标,每次酪酰胺反应后需进行HRP淬灭或抗体剥离。
8. 多色标记时,依据抗原密度不同选择不同荧光素(低密度抗原选择强染料;高密度抗原选择较弱染料)。标记顺序对最终标记效果有一定影响,需自行摸索。


说明书:

生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG 货号:               B6099S/B6099L  规格:               50 slides/200 slides B6099S/B6099L    
MSDS:

MSDS Y6081, Y6082, Y6083, Y6084, Y6085, Y6086, Y6087, Y6088, Y6089, Y6090, Y6091, Y6092, Y6093, Y6094, Y6095, B6099, B6100, B6101 TSA Kit
常见问题解答:

什么是TSA技术?

TSA技术,即酪酰胺信号放大技术(Tyramide signal amplification, TSA)是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。

TSA试剂盒有哪些组分?
试剂盒固定组分BSA、1×Tyramide Amplification Buffer,可变组分Tyramide Stock Solution, 200×、HRP-conjugated secondary antibody。Tyramide Stock Solution, 200×可根据需求选择不同波长的YF/Biotin染料。HRP-conjugated secondary antibody可根据一抗在Goat anti-mouse IgG、Goat anti-rabbit IgG、Streptavidin中进行三选一。

TSA试剂盒适用于哪些样本?
TSA试剂盒适用于细胞、石蜡切片、冰冻切片样本。

石蜡切片样本进行多色标记的步骤?
每一轮标记后执行微波处理(抗原修复步骤)以去除抗体,再接下一轮的标记,因此可选择同种属来源的一抗,二抗具有通用性。

细胞样本可以用TSA技术进行多色标记吗?
不推荐。若需要,建议使用细胞爬片或细胞涂片进行,并且抗体剥离及抗原修复推荐使用商业化的抗体剥离液,尽管如此,经过几轮染色清洗后,细胞流失仍会较多,可能不利于后续结果的分析,具体可根据需求尝试。

YF®594 Tyramide(YF®594酪胺),200× 货号: YT0072S/YT0072L 规格: 10 μL/100 μL

YF®594 Tyramide(YF®594酪胺),200×

产品货号: YT0072S/YT0072L

产品规格: 10 μL/100 μL

目录价(元):438/3063

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产品概述:

储存条件

-20避光保存,有效期见外包装

产品介绍

酪胺信号放大技术(Tyramide Signal Amplification)又称催化信号放大技术(Catalyzed Signal Amplification),是一类利用HRP对靶抗原进行高密度原位标记的酶学检测方法,其不但可以用于IF/IHC的信号放大,亦可用于Elisa、ISH等检测。
酪胺信号放大技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪胺的信号放大技术能够提供极强的灵敏度、检测极微量的目的抗原。酪胺信号放大技术极大的降低抗体的用量,节约抗体。酪胺信号放大试剂盒可与传统染色方法结合使用以多色成像,也可以顺序进行两个或更多个酪胺反应以标记一个样品上的不同靶标。

注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 与荧光二抗相比,TSA试剂盒显示出更高的灵敏度和更强的信号。因此,实验时一抗的使用浓度较低,这样可以降低非特异性结合带来的背景荧光,我们建议梯度设置一抗浓度以找到最佳浓度。
3. 如果需要考虑背景荧光,建议设置未与一抗孵育的阴性对照。确保该阴性对照在孵育和洗涤过程中没有被阳性样品中的试剂交叉污染。对于组织样品,我们还建议对未染色的对照(不添加抗体或酪酰胺)进行成像,以确定组织自发荧光对背景的影响。
4. 建议使用5 μg/mL的HRP结合物,降低浓度可能会影响信号强度和灵敏度。
5. 建议1 : 200稀释YF®/Biotin – Tyramide。较高的浓度可能会导致信号过强或背景高,可以从1 : 100到1 : 1000摸索以找到最佳浓度。
6. 可以在每个酪酰胺反应后通过进行HRP淬灭或抗体剥离,依次使用多个酪酰胺扩增试剂盒来标记同一样品上的不同靶标。
7. 若做多色标记时,依据抗原密度不同选择不同荧光素(低密度抗原选择强染料;高密度抗原选择较弱染料)。标记顺序对最终标记效果有一定影响,需自行摸索。


说明书:

YF®594 Tyramide(YF®594酪胺),200× 货号:               YT0072S/YT0072L  规格:               10 μL/100 μL YT0072S/YT0072L    
MSDS:

MSDS YT0069, YT0070, YT0076, YT0071, YT0072, YT0073, YT0074, YT0075 YF® Dye Tyramide, Biotin Tyramide, 200×

DiOC2(3)膜电位荧光探针 货号: D4027 规格: 20 mg

DiOC2(3)膜电位荧光探针

产品货号: D4027

产品规格: 20 mg

目录价(元):280

推荐仪器:流式细胞仪、荧光显微镜

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产品概述:

产品参数
外观:可溶于 DMSO 或 DMF 的橘红色固体
Ex/Em (MeOH):482/497 nm
CAS 号:905-96-4
分子式:
C21H21IN2O2
分子量:460.3

分子结构图:
DiOC2(3)膜电位荧光探针 货号:               D4027  规格:               20 mg

储存条件
-20℃ 避光保存,有效期见外包装。

产品介绍
DiOC2(3) (3,3′-Diethyloxacarbocyanine, 碘化物)是一种广泛应用的膜电位探针。如用于线粒体膜电位的研究,DiOC2(3)能够穿透真核细胞的细胞质,在浓度低于 100 nM 时,染料在具有活跃膜电位的线粒体中积累,形成红色荧光聚集体,当使用破坏线粒体膜电位的(如 CCCP)处理细胞时,DiOC2(3)染色强度降低。DiOC2(3)染色的细胞可以通过流式细胞仪的蓝色激发,绿色和红色发射可视化。该试剂可与其他试剂搭配使用,例如红色激发的 Annexin V–APC,用于活力和凋亡的研究。

注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

说明书:

DiOC2(3)膜电位荧光探针 货号:               D4027  规格:               20 mg D4027    
MSDS:

MSDS D4027 DiOC2(3)
使用本产品的文献:

参考文献
1.A test of the singlet oxygen mechanism of cationic dye photosensitization of mitochondrial damage
应用方向:哺乳动物膜电位:大鼠肝脏线粒体

2.Accurate flow cytometric membrane potential measurement in bacteria using diethyloxacarbocyanine and a ratiometric techniqUE
应用方向细菌膜电位(流式细胞仪检测)

3.Membrane potential modulates photocycling rates of bacterial rhodopsins
应用方向细菌膜电位:嗜盐杆菌

4.Selective staining by the fluorochrome, 5,5-diphenyl-9-ethyl-DiOC2(3). I. Physicochemical studies of dye-dye and dye-tissUE interactions
应用方向组织染色

5.Direct observation of sub-picosecond equilibration of excitation energy in the light-harvesting antenna of Rhodospirillum rubrum
应用方向:能量转移:红斑霉螺旋菌

MitoSceneTM Red CMXRos(线粒体红色荧光探针) 货号: M4067S/M4067L 规格: 50 µg/20 × 50 µg

MitoSceneTM Red CMXRos(线粒体红色荧光探针)

产品货号: M4067S/M4067L

产品规格: 50 µg/20 × 50 µg

目录价(元):400/3200

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产品概述:

产品参数
外观:可溶于DMSO的紫色固体
Ex/Em: 579/599 nm
分子式:C32H32Cl2N2O
分子量:531.5
CAS号:167095-09-2

储存条件
-20℃避光密封保存,配成溶液后避免反复冻融。有效期见外包装。

产品介绍

MitoSceneTM Red CMXRos是一种红色荧光染料,含有氯甲基官能团,可标记线粒体。MitoSceneTM Red CMXRos只需与活细胞简单孵育即可被动运输穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上,该染料的积累取决于膜电位的高低。一旦线粒体被染色后,还可根据后续实验的需求用醛类固定剂进行固定。对于免疫组化及原位杂交实验,细胞需先经过透化,MitoSceneTM Red CMXRos还可染色透化细胞的线粒体。该染料适合双标记实验,其红色荧光与其他的绿色荧光探针可以很好的区分开来。
虽然传统的线粒体荧光探针如TMR和罗丹明123,也可以很容易的聚集在功能线粒体上,但是一旦线粒体膜电位丧失即会被洗掉,从而在一些需要细胞进行醛类固定或者包含线粒体能量状态影响因子的实验中,使其应用大受限制。
以贴壁细胞(盖玻片)举例,每个样本100 μL染色工作液(500 nM),50 µg配置的工作液大概可以用于1880个样本。

注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 对于不同的细胞和组织,应选择合适的孵育时间和染色液浓度。
3. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

MitoSceneTM Red CMXRos(线粒体红色荧光探针) 货号:               M4067S/M4067L  规格:               50 µg/20 ×  50 µg M4067S/M4067L    
使用本产品的文献:

引用文献
1.Detection of Apoptosis in Live Cells by MitoTracker Red CMXRos and SYTO Dye Flow Cytometry
应用方向:线粒体染料,跟踪有丝分裂

2.Efficacy of MitoTracker Green and CMXrosamine to Measure Changes in Mitochondrial Membrane Potentials in Living Cells and TissUEs
应用方向:特异性染色线粒体

3.Two Phases of Signalling Between Mitochondria During Apoptosis Leading to Early Depolarisation and Delayed Cytochrome C Release
应用方向:线粒体去极化研究

4.Chloromethyl-X-Rosamine Is an Aldehyde-Fixable Potential-Sensitive Fluorochrome for the Detection of Early Apoptosis
应用方向:测定甲醛固定后细胞的delta-psi m检测

5.Opposite Effects of Microtubule-Stabilizing and Microtubule-Destabilizing Drugs on Biogenesis of Mitochondria in Mammalian Cells
应用方向:高Delta(psi)(m)的线粒体亚群检测

6.Evaluation of Fluorescent Dyes for the Detection of Mitochondrial Membrane Potential Changes in Cultured Cardiomyocytes
应用方向:染色心肌细胞的线粒体

7.Discrimination of DNA and RNA in Cells by a Vital Fluorescent Probe: Lifetime Imaging of SYTO13 in Healthy and Apoptotic Cells
应用方向:线粒体特异性染料

DASPEI线粒体荧光探针 货号: D4015 规格: 100 mg

DASPEI线粒体荧光探针

产品货号: D4015

产品规格: 100 mg

目录价(元):350

推荐仪器:荧光显微镜

大包装询价


产品概述:

产品参数
外观:可溶于 DMSO 的红色固体
Ex/Em:461/589 nm (MeOH)
CAS 号:3785-01-1
分子式:C17H21IN2
分子量:
380.3
分子结构图:
DASPEI线粒体荧光探针 货号:               D4015  规格:               100 mg

储存条件
4℃ 避光保存,有效期见外包装。

产品介绍
DASPEI 是一种苯乙烯基红色荧光染料,可以染色活细胞的线粒体。

注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
说明书:

DASPEI线粒体荧光探针 货号:               D4015  规格:               100 mg D4015    
MSDS:

MSDS D4015 DASPEI