5(6)-CFDA, SE(5(6)-羧基荧光素二乙酸,琥珀酰亚胺酯)
产品货号: C4070
产品规格: 5 mg
目录价(元):320
推荐仪器:荧光显微镜、流式细胞仪
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储存条件 产品介绍 注意事项
产品概述:
产品参数
外观:可溶于 DMSO 的白色或浅黄色固体
CAS 号:150347-59-4
Ex/Em:494/521 nm(pH=7)
分子式:C29H19NO11
分子量:557.5
细胞标记机制:
-20℃ 避光保存,有效期见外包装。
5(6)-CFDA, SE 是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞示踪染料,不仅可用于细胞增殖的体外实验,还可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程。
5(6)-CFDA, SE 是二乙酸荧光素(Fluorescein diacetate, FDA)的衍生物,具有细胞膜渗透性,本身不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后,被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester,CFSE),可发强烈的绿色荧光,不能穿透细胞膜,能完好的保留在胞内。CFSE 还可自发并不可逆地与细胞内的氨基结合从而偶联到细胞蛋白质上,同时过量且未被偶联的 5(6)-CFDA, SE通过被动扩散回到细胞外培养基内,被后续清洗步骤所清除。经 5(6)-CFDA, SE 标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数月,因此非常适用于细胞群落分析。
5(6)-CFDA, SE 标记细胞的荧光非常均一,优于以前使用的其他细胞示踪荧光探针如 PKH 26,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也很均一。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代细胞的一半,通过流式细胞仪(FL1 通道)根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2 的荧光强度),二次(1/4 的荧光强度),三次(1/8 的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。5(6)-CFDA, SE 可检测分裂次数多达八次甚至更多。经 5(6)-CFDA, SE 标记的细胞可用于体外和体内增殖研究 ,且具有不会使邻近细胞染色的功能 。5(6)-CFDA, SE 最常用于淋巴细胞的增殖检测,也可用于成纤维细胞,自然杀伤细胞,造血祖细胞等其他细胞的增殖检测。
5(6)-CFDA, SE 标记细胞呈绿色荧光,除了流式细胞仪检测细胞增殖外,还可用荧光酶标板定量活细胞数目,或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。
1. 5(6)-CFDA, SE 与胺基反应,所以实验过程中不可使用含胺的缓冲液。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
说明书:
C4070
常见问题解答:
◆细胞追踪有很多产品,该如何选择?
首先确定追踪细胞的时间,然后考虑染料结合机制。
1.钙黄绿素染料(C4041)标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果极佳,但也会被某些类型细胞迅速外排。
2.亲脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能标记细胞膜而不破坏其功能,并且能持续更长时间,但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外,它们还会在透化过程中丢失。
3.CellTracker染料(C4060)更有利于长期标记,其带有温和的氯甲基反应基团使之能够与细胞组分共价结合。
4.CFDA SE(C4070)也能共价地结合于细胞组分。
在所有列出的试剂中,细胞内保留与否取决于细胞分裂的速率和细胞的固有特性(主动外排,膜和蛋白质的周转率等)。其中共价结合试剂比非共价结合的试剂展现出更长的保留时间
◆CFDA SE能否用于干细胞的增殖检测?
CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒可以用于各种常见细胞的增殖和示踪检测,包括干细胞、神经细胞等
◆称量粉末的时候需要避光吗?
建议避光的
◆该产品是无菌的吗?
是粉末,用DMSO配制母液,不需要做过滤除菌
使用本产品的文献:
参考文献
1.5,6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester-labeled apoptotic and necrotic as well as detergent-treated cells can be traced in composite cell samples.
应用方向:除追踪活细胞外,还可以用来追踪复合样本中的死亡细胞
2.Vascularized organoid engineered by modular assembly enables blood perfusion
应用方向:标记HepG2细胞进行共培养
3.Decreased proliferative capability of CD4(+) cells of elderly people is associated with faster loss of activation-related antigens and accumulation of regulatory T cells.
应用方向:染色组织块上采集的静脉血中分离出的外周血单个核细胞(PBMC)
4.Glioma stem cells promote radioresistance by preferential activation of the DNA damage response.
应用方向:对原发性胶质母细胞瘤T3590进行标记
5.Deletion of a coordinate regulator of type 2 cytokine expression in mice.
应用方向:标记CD4+T细胞
6.Fluorescent labeling of nano-sized vesicles released by cells and subseqUEnt quantitative and qualitative analysis by high-resolution flow cytometry.
应用方向:使用CFSE进行标记的外泌体可以用于后续FACS、NTA和显微镜观察使用